英文名稱 ： D-lactate Dehydrogenase(D-LDH)Activity Assay Kit
產品包裝 ： 盒裝
產品規格 ： 100T/48S
儲存條件 ： -20℃
檢測方法 ： 微量法
有 效 期 ： 6個月
產品組成：
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試劑名稱
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規格
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保存條件
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提取液
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液體60mL×1瓶
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2-8℃保存
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試劑一
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液體7mL×1瓶
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2-8℃保存
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試劑二
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粉劑×1支
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-20℃保存
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試劑三
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液體7mL×1瓶
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2-8℃保存
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試劑四
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液體20mL×1瓶
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2-8℃保存
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標準品
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液體1mL×1支
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2-8℃保存
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產品說明：
乳酸脫氫酶(Lactate dehydrogenase ，LDH)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中，是糖酵解途徑的 末端酶，催化丙酮酸與乳酸之間的可逆反應， 伴隨著NAD+/NADH之間互變。根據其催化底物-乳酸構型的不同， 可分為D-乳酸脫氫酶(D-LDH ，EC 1.1.1.28)與L-乳酸脫氫酶(L-LDH ，EC 1.1.1.27 )。
D-LDH催化NAD+氧化D-乳酸生成丙酮酸，丙酮酸進一步與2,4-二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙，在堿 性溶液中顯棕紅色， 顏色深淺與丙酮酸濃度成正比。
注意：實驗之前建議選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者 增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、水浴鍋/恒溫培養箱、臺式離心機、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、 研缽/勻漿器/細胞超 聲破碎儀、冰和蒸餾水。
注意事項：
1.如果測定管吸光值接近空白或 ΔA 測定過低，可適當加大樣本量后重新測定；如果測定管吸光值超過1.5或 ΔA測定超過 0.4，建議將樣本用提取液適當稀釋后進行測定。注意同步修改計算公式。
驗實例：
1、取0.109g兔腎加入1mL提取液進行冰浴勻漿，按照測定步驟操作，用 96孔板測得計算 ΔA 測定=A 測定-A 對照=0.425-0.298=0.127,帶入標準曲線y=0.5379x+0.0087，計算 x=0.220 ,按樣本質量計算酶活得：
D-LDH 活性(U/g質量)=66.67×x÷W×F =134.520U/g質量
2、取0.1018g擬南芥加入1mL提取液進行冰浴勻漿，按照測定步驟操作，用96孔板測計算ΔA測定=A測定-A對照=0.236-0.196=0.04 ,帶入標準曲線 y=0.5379x+0.0087，計算 x=0.058 ,按樣本質量計算酶活得：
D-LDH 活性(U/g質量)=66.67×x÷W×F =38.109 U/g質量
3、取 500萬細胞加入1mL提取液進行冰浴勻漿，按照測定步驟操作, 用96孔板測得計算 ΔA 測定=A 測定-A 對照=0.225-0.174=0.051,帶入標準曲線 y=0.5379x+0.0087，計算 x=0.079 ,按細菌/細胞數目計算酶活得：
D-LDH 活性(U/10?cell)=0.133×x×F =0.010 U/10? cell
4、取10μL胎牛血清，按照測定步驟操作，用96孔板測得計算ΔA測定=A測定-A對照=0.322-0.201=0.121,帶入標準曲線y=0.5379x+0.0087，計算 x=0.209 ,
按液體體積計算酶活得：
D-LDH 活性(U/mL)=66.67×x×F =13.919 U/mL
