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D-乳酸(D-LA)/含量檢測(cè)試劑盒(WST顯色法)/100T

品牌:紀(jì)寧生物

貨號(hào):JN37873

規(guī)格: 100T/48S

聯(lián)系方式:021-54721350

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產(chǎn)品詳情

英文名稱 : D-Lactic acid(D-LA)Content Assay Kit
產(chǎn)品包裝 : 盒裝
產(chǎn)品規(guī)格 : 100T/48S
儲(chǔ)存條件 : -20℃
檢測(cè)方法 : 微量法
有 效 期  : 6個(gè)月

產(chǎn)品組成:

試劑名稱

規(guī)格

保存條件

提取液一

液體60mL×1瓶

2-8℃保存

提取液二

液體10mL×1瓶

2-8℃保存

試劑一

液體10mL×1瓶

2-8℃保存

試劑二

粉劑×1

-20℃保存

試劑三

粉劑×1 瓶

-20℃保存

試劑四

液體 4 mL×1 瓶

2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品

液體 1mL×1 支

-20℃保存

產(chǎn)品說明:

乳酸是生物體代謝過程中重要的中間產(chǎn)物,與糖代謝、脂類代謝、蛋白質(zhì)代謝及細(xì)胞內(nèi)能量代謝密切相關(guān),乳酸含量是評(píng)估糖元代謝的和有氧代謝的重要指標(biāo)。D-乳酸在D-乳酸脫氫酶的作用下生成丙酮酸,同時(shí)使NAD+ 還原生成NADH和H+ ,在1-mPMS作用下,WST- 1可與NADH反應(yīng),產(chǎn)生水溶性formazan,其在450nm處有吸收峰, 據(jù)此可計(jì)算D-乳酸含量。





注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者 增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。


需自備的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、分析天平、研缽/勻漿器/超聲波細(xì)胞破碎儀、離心機(jī)、1m玻璃比色皿、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、蒸餾水和冰。

注意事項(xiàng):
1. 提取液一中含有蛋白質(zhì)沉淀劑, 因此上清液不能用于蛋白濃度測(cè)定。如需測(cè)定蛋白含量,需另取組織。
2. ΔA測(cè)定的測(cè)定范圍在0.01- 1.2之間。如果測(cè)定吸光值超過線性范圍吸光值,可以用蒸餾水稀釋樣本后再次測(cè)定,如果測(cè)定吸光值小于線性范圍吸光值,需要增加樣本量后再次測(cè)定,注意同步計(jì)算公式。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例:
1、取0.10?g 兔肌肉加入1mL提取液一,冰浴勻漿后離心,取0.8mL上清后加 0.15mL 提取液二,離心取上清后 按照測(cè)定步驟操作, 使用96孔板測(cè)得計(jì)算 ΔA 測(cè)定管=A測(cè)定-A對(duì)照=0.321-0.179=0.142,ΔA 標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.405-0.122=0.283,

按樣本質(zhì)量計(jì)算含量得:
D-LA含量(μmol/g質(zhì)量)= 0.3711×ΔA 測(cè)定÷ΔA 標(biāo)準(zhǔn)÷W =1.7904 μmol/g質(zhì)量。
2 、取100μL牛血清加入1mL提取液一,離心,取0.8mL上清后加 0.15mL提取液二,離心取上清,之后按照測(cè)定步驟操作,使用96孔板測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定管=A測(cè)定-A 對(duì)照=0.221-0.169=0.052,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A 標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.405-0.122=0.283,按照液體

體積計(jì)算含量得:
D-LA 含量(μmol/mL)= 4.082×ΔA 測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)=0.75μmol/mL。
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