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牛血清知多少?一文搞懂胎牛、小牛、新生牛血清的區別與應用

     牛血清是細胞培養實驗中最常用的培養基補充物之一。它作為一種成分復雜的混合物,可以為細胞提供豐富的營養物質、生長因子和多種促貼壁因子,從而促進細胞的增殖與存活。

 

    不同牛血清的特點

 

    胎牛血清是一種高度富含細胞生長因子、激素和蛋白質的補充物,因此在細胞培養中被廣泛用于促進細胞生長。然而,它的成分復雜且批次間差異大,并存在攜帶病原體和引發免疫反應的風險。

 

    新生牛血清其主要特點是抗體(尤其是IgG)含量遠高于胎牛血清。雖然它的生長因子含量不如FBS豐富,但仍具有一定的促生長能力。因此,它通常不適用于免疫細胞(如淋巴細胞)的培養,因為高濃度的抗體會嚴重干擾實驗結果。NCS主要被用作一種經濟高效的補充物,用于大規?;虺R幍募毎S持培養,特別是那些生命力頑強、對血清質量不敏感的細胞系

 

    小牛血清是從小牛血液中提取的血清。它和FBS的主要區別在于,其生長因子濃度較低,而免疫球蛋白(抗體)等大分子蛋白質含量更高。這使得它的促增殖效果不如FBS強勁,因此常被用作一種經濟型選擇,適用于培養對生長因子依賴性較低的細胞系,或用于細胞的維持而非快速擴增,例如在某些肌肉細胞和骨髓細胞的培養中。

 

    成牛血清是從成年牛血液中提取,其低生長因子、高抗體的特性最為顯著。與胎牛血清相比,它的生長因子水平最低,而免疫球蛋白等總蛋白含量最高。這種成分特點使其不適合大多數細胞的增殖培養。因此,ABS在細胞培養中極為罕見,它最常見的用途是憑借其高蛋白和低成本的優勢,在WesternBlotELISA等免疫分析實驗中用作封閉液,以減少背景信號。

 

    牛血清分類

 

    《中華人民共和國藥典》(2020版,三部)的定義:

 

    新生牛血清:主要為滿足人用生物制品(如疫苗)生產的質控要求。其定義為:本品系取自出生后24小時內未哺乳的新生牛的血液,經分離、除菌過濾制成的液體。這一嚴格規定旨在確保血清中的母源抗體含量極低。

 

    《中國藥典》并未對其他類型的牛血清(如胎牛血清)設立獨立的通用標準。

 

    《中華人民共和國獸藥典》(2020版)的定義:

 

    新生牛血清:定義為:本品系取自出生后14d內未采食初乳的新生牛的血液,經分離、除菌過濾制成的液體。這里的時間范圍(14天)遠長于《中國藥典》的規定。

 

    胎牛血清:定義為:本品系無菌采集健康妊娠母牛屠宰時的胎牛血液,經分離、除菌過濾制成的液體。該定義較為寬泛,并未限定具體的胎齡或采集方法。行業內普遍認為通過心臟穿刺采集的孕晚期胎牛血清質量更優,但這屬于生產工藝的優化,而非藥典的強制規定。

 

    使用注意事項

 

    選擇優質供應商:為保證實驗結果的穩定性和可重復性,應選擇信譽良好、質控嚴格的血清供應商,并索要其質檢報告,確保產品無菌、無支原體、內毒素含量低。

 

    進行批次測試:鑒于血清存在顯著的批次間差異,更換新批次血清前必須進行測試。通過比較不同批次對目標細胞的生長支持能力,篩選出最適合的批次進行實驗。

 

    正確儲存與使用:血清需在-20°C或以下避光凍存。為避免反復凍融破壞其有效成分,首次解凍后應立即無菌分裝成單次用量,后續只取用分裝管,避免整瓶多次凍融。

 

    綜上所述,牛血清并非簡單的細胞糧食,而是一種高度可變的關鍵實驗試劑。無論是胎牛血清的高效能,還是成牛血清的經濟性,其選擇都必須與具體的細胞類型、實驗目的和質控標準緊密掛鉤。因此,深入理解不同血清的特性、嚴格遵守使用規范,并堅持進行批次篩選,這并非可有可無的附加步驟,而是確保實驗科學性與可重復性的核心要求。

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