英文名稱 : Creatine Content Assay Kit
產(chǎn)品包裝 : 盒裝
產(chǎn)品規(guī)格 : 100T/48S
儲存條件 : 2-8℃
檢測方法 : 微量法
有 效 期 : 6個月
產(chǎn)品內(nèi)容:
試劑名稱
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規(guī)格
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保存條件
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提取液一
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液體60mL×1瓶
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2-8℃保存
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提取液二
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液體10mL×1瓶
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2-8℃保存
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試劑一
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粉劑×1 支
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2-8℃保存
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試劑一稀釋液
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液體5 mL×1瓶
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2-8℃保存
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試劑二
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液體2 mL×1瓶
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2-8℃保存
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標準品
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粉劑×1 支
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2-8℃保存
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產(chǎn)品說明:
肌酸(Creatine)是一種含氮化合物,自然存在于脊椎動物體內(nèi),能夠輔助為肌肉和神經(jīng)細胞提供能量。肌酸可由精氨酸(arginine)、甘氨酸(glycine)及甲硫氨酸(methionine)三種氨基酸合成,可由人體自行合成,也可以從食物中攝取。大約95%的肌酸存在于骨骼肌中,主要存在形式為磷酸肌酸。肌酸作為一種補充劑主要通過增加肌肉質量,增強運動表現(xiàn)能力。
肌酸也被作為神經(jīng)肌肉疾病的一種治療藥被廣泛研究,它可能有助于保護神經(jīng)和改善細胞生物功能狀態(tài)。
肌酸可在堿性條件下與聯(lián)乙酰-α-萘酚發(fā)生反應,生成紅色產(chǎn)物在530nm處有吸收峰。
注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、低溫離心機、可調式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
注意事項:
1、顯色完成后,請在10min之內(nèi)完成檢測。
2、提取液中含有蛋白沉淀劑,提取的上清液不能用于蛋白濃度的測定。若想要用蛋白濃度計算肌酸含量需要另取樣本,即取相同質量的組織、同等數(shù)目的細菌或細胞,用1.1875mLPBS(生理鹽水)勻漿;取相同體積的血清(漿),用1.206mLPBS(生理鹽水)勻漿(相當于提取步驟最終樣本上清液),用BCA法進行蛋白濃度測定。
3、如果測定吸光值低于或超過標準溶液線性范圍的吸光值,可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進行測定。
4、試劑一、試劑二對人體有刺激性,請采取適當?shù)姆雷o措施。為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴乳膠手套操作。
實驗實例:
1、取0.1g兔腎臟加入1mL提取液一進行勻漿研磨離心,取0.8mL上清后加0.15mL提取液二,離心取上清后按照測定步驟操作,用96孔板測定后計算ΔA測定=A測定-A對照=0.128-0.064=0.064,帶入標準曲線y=0.0062x-0.0143,計算x=12.629。按樣本質量計算含量得:肌酸含量(μg/g質量)=1.044×x÷W=131.85μg/g質量。
2、取100μL牛血清加入1mL提取液一,離心取0.8mL上清后加0.15mL提取液二,離心取上清,之后按照測定步驟操作,用96孔板測定后計算ΔA測定=A測定-A對照=0.271-0.07=0.201,帶入標準曲線y=0.0062x-0.0143,計算x=34.726。按照液體體積計算含量得:肌酸含量(μg/mL)=11.482×x=398.7μg/mL。