英文名稱(chēng) ：Glutamate(Glu)Content Assay Kit(WST colorimetry)
儲(chǔ)存條件 ：-20℃
產(chǎn)品包裝 ：盒裝
檢測(cè)方法 ：可見(jiàn)分光光度法
有 效 期 ：6個(gè)月
產(chǎn)品規(guī)格 ：50T/24S
產(chǎn)品組成：
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試劑名稱(chēng)
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規(guī)格
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保存條件
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試劑一
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液體70mL×1瓶
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2-8℃保存
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試劑二
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液體2.5mL×1瓶
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2-8℃保存
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試劑三
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粉劑×2瓶
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-20℃保存
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試劑四
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粉劑×2支
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-20℃保存
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試劑五
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液體12mL×1瓶
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2-8℃保存
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標(biāo)準(zhǔn)液
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液體0.5mL×1支
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2-8℃保存
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產(chǎn)品說(shuō)明：
Glu廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，不僅是組成蛋白質(zhì)的20種氨基酸之一，而且通過(guò)轉(zhuǎn)氨基作用參與多種氨基酸合成，是生物體內(nèi)主要氨基來(lái)源之一。此外，Glu還是味精的主要有效成分，常用做食品添加劑以及香料生產(chǎn)。
谷氨酸脫氫酶(GDH)催化谷氨酸和NAD生成α-酮戊二酸、NADH和NH??在1-mPMS作用下，WST-1可與NADH反應(yīng)，產(chǎn)生水溶性formazan，計(jì)算谷氨酸含量。
技術(shù)指標(biāo)：
最低檢出限：0.009μmol/mL
線(xiàn)性范圍：0.019-0.3125μmol/mL
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)，如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器/超聲破碎儀、冰、蒸餾水。
注意事項(xiàng)：
如果測(cè)定吸光值超過(guò)線(xiàn)性范圍吸光值，可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進(jìn)行測(cè)定。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：
1、稱(chēng)取約0.1g鼠肺，加入1mL試劑一，冰浴研磨，10000g，常溫離心10min取上清，待測(cè)。之后按照測(cè)定步驟操作，用比色皿測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定-A對(duì)照=0.475-0.345=0.13，標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)y=1.7612x+0.0039，根據(jù)標(biāo)曲得出x=0.072，谷氨酸含量得：谷氨酸含量(μmol/g質(zhì)量)=x×V樣本÷(W÷V樣總×V樣本)=x÷W=0.72μmol/g。
2、吸取0.2mL羊血清，按照測(cè)定步驟操作，用比色皿測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定-A對(duì)照=0.669-0.141=0.528，
標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)y=1.7612x+0.0039，根據(jù)標(biāo)曲得出x=0.298，谷氨酸含量得：
