英文名稱 ：Glutamate(Glu)Content Assay Kit (WST colorimetry)
儲(chǔ)存條件 ：-20℃
產(chǎn)品包裝 ：盒裝
檢測方法 ：微量法
有 效 期 ：6個(gè)月
產(chǎn)品規(guī)格 ：100T/48S
產(chǎn)品組成：
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試劑名稱
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規(guī)格
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保存條件
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試劑一
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液體85mL×1瓶
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2-8℃保存
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試劑二
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液體1.5mL×1支
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2-8℃保存
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試劑三
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粉劑×2瓶
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-20℃保存
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試劑四
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粉劑×2支
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-20℃保存
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試劑五
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液體4mL×1瓶
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2-8℃保存
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標(biāo)準(zhǔn)液
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液體0.5mL×1支
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2-8℃保存
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產(chǎn)品說明：
Glu廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，不僅是組成蛋白質(zhì)的20種氨基酸之一，而且通過轉(zhuǎn)氨基作用參與多種氨基酸合成，是生物體內(nèi)主要氨基來源之一。此外，Glu還是味精的主要有效成分，常用做食品添加劑以及香料生產(chǎn)。
谷氨酸脫氫酶(GDH）催化谷氨酸和NAD生成α-酮戊二酸、NADH和NH4+，在1-mPMS作用下，WST-1可與NADH反應(yīng)，產(chǎn)生水溶性formazan，計(jì)算谷氨酸含量。
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)，如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器/超聲破碎儀、冰、蒸餾水。
注意事項(xiàng)：
如果測定吸光值超過線性范圍吸光值， 可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進(jìn)行測定。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：
1 、稱取約 0.1g 鼠肺， 加入 1mL 試劑一，冰浴研磨， 10000g，常溫離心 10min 取上清，待測。之后按照測 定步驟操作，用 96 孔板測得計(jì)算 ΔA =A2 -A1=0.449-0.384=0.065，標(biāo)準(zhǔn)曲線 y=1.5338x+0.0091，根據(jù)標(biāo) 曲得出 x=0.036，谷氨酸含量得：谷氨酸含量(μmol/g 質(zhì)量) =x×V 樣本÷(W÷V 樣總×V 樣本) =x÷W=0.36μmol/g。
2、吸取 0.04 mL 羊血清，按照測定步驟操作， 用 96 孔板測得計(jì)算 ΔA =A2-A1=0.379-0.105=0.274，標(biāo)準(zhǔn)曲
線 y=1.5338x+0.0091，根據(jù)標(biāo)曲得出 x=0.173，谷氨酸含量得：
谷氨酸含量(μmol/mL)=x×V 樣本÷V 樣本=x=0.173μmol/mL。
