英文名稱 : α-Mannosidase(α-man)Activity Assay kit
產品包裝 : 盒裝
產品規格 : 50T/24S
儲存條件 : -20℃
檢測方法 : 可見分光光度法
有 效 期 : 6個月
產品組成:
試劑名稱
|
規格
|
保存條件
|
提取液一
|
液體60mL×1瓶
|
2-8℃保存
|
試劑一
|
液體50mL×1瓶
|
2-8℃保存
|
試劑二
|
粉劑×2支
|
-20℃保存
|
試劑三
|
粉劑20mL×1瓶
|
-20℃保存
|
試劑四
|
液體3mL×1瓶
|
2-8℃保存
|
標準品
|
液體1mL×1支
|
-20℃保存
|
產品說明:
α-man 分布廣泛、種類繁多,在真核生物胞質、內質網、高爾基體、溶酶體中都有發現,不同種類、功能的 α-man 共同參與 N-聚糖的修飾過程。α-man 和特定底物發生反應,其生成物在 405nm 處有特征吸收峰,根據吸光度的變化率可計算出 α-man 活性。
注意:實驗之前建議選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者 增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、低溫離心機、恒溫培養箱/水浴鍋、可調式移液器、1 mL 玻璃比色皿、勻漿器/研缽、冰和 蒸餾水。
注意事項:
如果測定吸光值A>1.5或ΔA>1,建議稀釋樣本后再測定, 計算公式中乘以稀釋倍數;如果測定吸光值較低或接近空白OD值, 建議增加樣本量后再進行測定。
實驗實例:
1 、稱取 0.1 g 兔子肝臟組織,加入 1 mL 提取液, 冰浴勻漿, 12000 g ,4℃條件下離心 10 min;取上清置于冰上 待測。使用 1mL 玻璃比色皿按照測定步驟操作,計算 ΔA=A 測定管-A 對照管=0.404-0.309=0.095 ,標準曲線 y=2.0294x+ 0.0092,計算 x=0.0422 ,按公式計算活性:
α-甘露糖苷酶酶活(U/g 質量) = x×0.1÷W×F = 0.0422U/g質量
2 、稱取 0.1 g 草莓果肉,加入1 mL提取液, 冰浴勻漿,12000 g ,4℃條件下離心10 min;取上清置于冰上待測。 使用1mL玻璃比色皿按照測定步驟操作,計算 ΔA=A測定管-A 對照管=0.113-0.091=0.022 ,標準曲線 y=2.0294x+ 0.0092,計算 x=0.0063 ,按公式計算活性:
α-甘露糖苷酶酶活(U/g 質量) = x×0.1÷W×F = 0.0063 U/g質量