英文名稱 :α-Amylase(α-AL)Activity Assay Kit(Iodine-starch colorimetry)
產(chǎn)品包裝 :盒裝
產(chǎn)品規(guī)格 :100T/48S
儲(chǔ)存條件 :-20℃
檢測(cè)方法 :微量法
有 效 期 :6個(gè)月
產(chǎn)品組成:
試劑名稱
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規(guī)格
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保存條件
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試劑一
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粉劑×1 瓶
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2-8℃保存
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試劑二
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液體10mL×1支
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2-8℃保存
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試劑三
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液體30mL×1瓶
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2-8℃保存
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標(biāo)準(zhǔn)品
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粉劑×1瓶
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2-8℃保存
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產(chǎn)品說明:
淀粉酶負(fù)責(zé)水解淀粉,包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。α-淀粉酶(EC 3.2.1.1)可隨機(jī)地作用于淀粉中的α-1,4-糖苷鍵,生成葡萄糖、麥芽糖、麥芽三糖、糊精等還原糖,同時(shí)使淀粉的粘度降低,因此又稱為液化酶。
α-淀粉酶催化淀粉分子中的α-1,4糖苷鍵水解,產(chǎn)生葡萄糖、麥芽糖以及糊精等,碘可以與未被水解的淀粉結(jié)合, 生成在570nm下有特征吸收峰的復(fù)合物,其深淺可計(jì)算出淀粉酶的活力單位。α-AL耐熱,但是β-淀粉酶可在70℃ 鈍化15min。因此粗酶液經(jīng)過70℃鈍化15min,就只有α-AL能夠催化淀粉水解。
注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者 增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品:
酶標(biāo)儀/可見分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、96孔板/微量玻璃比色皿、研缽/勻漿器、 蒸餾水。
注意事項(xiàng):
取約 0.1g 藜葉片,加1mL蒸餾水勻漿,勻漿后在室溫下放置提取15min,每隔5min 振蕩 1 次,使其充分提 取; 6000g,室溫離心 10min,吸取上清液,之后按照測(cè)定步驟操作,用96孔板測(cè)得計(jì)算 ΔA 測(cè)定=A空白-(A 測(cè)定-A 對(duì)照) =1.065-(0.849-0.220)=0.436 ,帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線 y=2.628x-0.0051 ,計(jì)算 x=0.168,按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得:
α-淀粉酶活性 (U/g 質(zhì)量)=0.1×x÷W=0.168 U/g 質(zhì)量。