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L-乳酸脫氫酶(L-LDH)/活性檢測試劑盒/50T

品牌:紀寧生物

貨號:JN37879

規格: 50T/24S

聯系方式:021-54721350

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產品詳情

英文名稱 : Lacate Dehydrogenase(LDH) Activity Assay Kit
產品包裝 : 盒裝
產品規格 : 50T/24S
儲存條件 : -20℃
檢測方法 : 可見分光光度法
有 效 期 : 6個月

產品組成:

試劑名稱

規格

保存條件

提取液

液體30mL×1瓶

2-8℃保存

試劑一

液體25 mL×1瓶

2-8℃保存

試劑

粉劑×1 支

-20℃保存

試劑

液體25mL×1瓶

2-8℃保存

試劑

液體 60 mL×1

2-8℃保存

標準品

液體1 mL×1支

2-8℃保存


產品說明:
L-LDH(EC 1.1.1.27)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,是糖酵解途徑的末端酶, 催化丙酮酸與L-乳酸之間的可逆反應,伴隨著NAD+/NADH之間互變。

L-LDH催化NAD+氧化L-乳酸生成丙酮酸, 丙酮酸進一步與2,4-二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙,在堿性溶液中顯棕紅色,顏色深淺與丙酮酸濃度成正比。




注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者 增加樣本量進行檢測。


需自備的儀器和用品:
可見分光光度計,恒溫水浴鍋,臺式離心機,可調式移液器,1mL玻璃比色皿,研缽/勻漿器/細胞超聲破碎儀,冰和蒸餾水。

注意事項:
ΔA大于1.3或者小于0.01時,建議將樣本用蒸餾水稀釋或者增大樣本量進行實驗,注意同步修改計算公式。

實驗實例:
1. 稱取0.103g景天葉片,加入1mL提取液,進行冰浴勻漿,8000g,4℃離心10min,取上清置冰上待測。之后按照測定步驟操作,用1mL玻璃比色皿測得計算ΔA=A測定管-A  對照管=0.206-0.134=0.072,帶入標曲y=0.6238x+0.0227 ,R2=0.9983,得x=0.079 μmol/mL,計算乳酸脫氫酶活性得:L-LDH(U/g質量)=66.67×x÷W =51.14 U/g

2. 稱取0.109g兔肝,加入1mL提取液,進行冰浴勻漿,8000g,4℃離心10min,取上清用蒸餾水稀釋80倍后 置冰上待測。之后按照測定步驟操作,用1mL玻璃比色皿測得計算 ΔA=A測定管-A對照管=0.936-0.095=0.841,帶入標曲y=0.6238x+0.0227 ,R2=0.9983,得 x=1.312 μmol/mL,計算乳酸脫氫酶活性得:
L-LDH(U/g質量)=66.67×x÷W ×稀釋倍數=64198.93U/g

3. 取50μL馬血清之后按照測定步驟操作,用1mL玻璃比色皿測得計算ΔA=A測定管-A對照管=0.529-0.155=0.374,帶入標曲y=0.6238x+0.0227,R2=0.9983,得x=0.563 μmol/mL,計算乳酸脫氫酶活性得:
L-LDH(U/mL)=66.67×x =37.535 U/mL
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