別人的，都是故事。自己的，才是生活。聽一千遍別人的故事，不如做一件自己的事。只要下定了決心，從什么時(shí)候開始都不晚，做行動(dòng)的巨人。充實(shí)自己，強(qiáng)大自己，才是最好的靠山!早啊!上海紀(jì)寧生物與你分享小鼠ELISA試劑盒的使用技巧！

1 仔細(xì)閱讀說明書，熟悉整個(gè)流程，推薦畫出簡要步驟圖；提前準(zhǔn)備試劑。
2 樣本的準(zhǔn)備：盡量使用新鮮樣本，不使用有溶血，被細(xì)菌污染、標(biāo)本保存時(shí)間過長和標(biāo)本凝固不全的樣本。小鼠ELISA試劑盒檢測宜采集新鮮標(biāo)本，如不能立即測定，5天之內(nèi)應(yīng)4℃保存，對(duì)于1周后檢測的樣本應(yīng)低溫凍存；做好分裝，長時(shí)間凍存的樣本避免反復(fù)凍融。
3 不同批次的小鼠ELISA試劑盒不要混用，檢查各組分的有效期。
4 預(yù)包被的酶標(biāo)板條和各試劑組份需要室溫平衡30min以上，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需溫度，預(yù)防后續(xù)實(shí)驗(yàn)中由于孵育溫度或是時(shí)間不夠充分，而將一些弱陽性樣本不能檢出。
5 待測樣本加樣：待檢樣本過多時(shí)，建議分批操作；需要稀釋的樣本提前做好稀釋，注意選對(duì)合適稀釋液；控制好加樣時(shí)間，避免加樣費(fèi)時(shí)過長造成誤差；注意加樣角度，垂直加入孔底，不要接觸孔壁, 做到一份樣本一個(gè)移液頭，防止交叉污染。
6 溫育和洗板：溫育時(shí)間和溫度一般根據(jù)試劑盒的說明書進(jìn)行選擇。溫育時(shí)可以采用水浴或者濕盒孵育,避免“邊緣效應(yīng)”。①手工洗板時(shí)，拍板時(shí)要垂直，避免交叉污染，用力不能過猛，防止抗原抗體復(fù)合物脫離；②洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢。
7 顯色：一般是以雙組份（A：過氧化脲工作液，B液：TMB 工作液）為底物顯色液。反應(yīng)條件為37℃避光孵育15-30min。
8 讀數(shù)和數(shù)據(jù)分析：終止后讀取結(jié)果盡量在15min內(nèi)完成，讀取OD值時(shí)酶標(biāo)儀需先預(yù)熱15～30 min再進(jìn)行。數(shù)據(jù)分析一般用四參數(shù)和直線擬合法，選擇哪種擬合方式，可以依據(jù)標(biāo)曲的相關(guān)系數(shù)（R2）來確定，R2一般大于0.95可用。大于0.99是最佳。
ELISA試劑盒是一個(gè)很好的科研工具只要選對(duì)了、用對(duì)了實(shí)驗(yàn)就會(huì)事半功倍。以上是上海紀(jì)寧生物分享的如何使用小鼠ELISA試劑盒技巧希望對(duì)您有所幫助。