一、直接ELISA

原理：將抗原與固相載體連接，洗滌除去未結合的抗原及雜質。加酶標抗體進行孵育。固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結合。徹底洗滌未結合的酶標抗體。此時固相上帶有的酶量與標本中受檢抗原的量相關。加底物反應。直接法主要用于測定抗原。

優點：操作流程簡短，實驗步驟少；無需使用二抗，避免了交叉反應；實驗步驟少，操作不易出錯。

缺點：實驗中的一抗需要直接用酶標記，成本相對較高。

二、競爭法ELISA

原理：競爭法ELISA更為復雜，通常用于檢測小分子如半抗原、激素、藥物等。樣品中待檢游離抗原與固定于固相載體上的抗原一起競爭相同的有限量抗體，當樣品中的游離抗原越多，就可結合越多的抗體，而固相抗原只能結合較少的抗體。反之亦然。經洗滌去除樣品中的抗原與抗體的結合物，只留下固相抗原與抗體的結合物。顯示經計算可得樣品中抗原的含量。競爭法可根據實驗設置直接法、間接法或夾心法形式。