英文名稱 : ATP、ADP、AMP Content HPLC Assay Kit
產品包裝 : 盒裝
產品規格 : 50T/48S
儲存條件 : -20℃
檢測方法 : 高效液相色譜法
有 效 期 : 6個月
產品簡介 :
核苷酸具有重要的生物學功能,是一類由嘌呤堿或嘧啶堿、核糖或脫氧核糖以及磷酸三種物質組成的化合物,主要參與構成核苷。
三磷酸腺苷(ATP)被認為是一種在所有生物體生存和繁殖的細胞合成中必不可少的普遍能量來源。ATP可通過多種細胞途徑產生。典型的如在線粒體中通過氧化磷酸化由三磷酸腺苷合酶合成,或者在植物的葉綠體中通過光合作用合成。ATP合成的主要能源為葡萄糖和脂肪酸。
二磷酸腺苷(ADP)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中。在生物體內,通常為三磷酸腺苷(ATP)水解失去一個磷酸根,即斷裂一個高能磷酸鍵,并釋放能量后的產物。
一磷酸腺苷(AMP)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,是在機體內由ATP與ADP釋放能量之后形成的。可以繼續結合磷酸基團形成二磷酸腺苷(ADP)和三磷酸腺苷(ATP)。是ATP不完全水解的產物。
ATP、ADP、AMP在254nm下有吸收峰,可以利用高效液相色譜法根據不同的出峰時間和峰面積來測定不同核苷酸含量。
試驗中所需的儀器和試劑:
高效液相色譜儀(C18柱(4.6×250mm)、紫外檢測器(VWD))、臺式離心機、可調式移液槍、研缽/勻漿器、棕色EP管、0.45μm水系針頭式過濾器(50個)、注射器、抽濾器、有機系濾膜、水系濾膜、2mL棕色進樣瓶(50個)、色譜純乙腈(500mL)、超純水。
注意事項:
1.測試完畢后,需要用高濃度的超純水相沖洗色譜柱(約20-30個柱體積),以防阻塞色譜柱,按柱子的種類規范沖洗,防止損傷色譜柱。
2. 標準品的稀釋倍數要根據樣品中不同核苷酸的濃度確定,樣品中不同核苷酸的峰面積必須在其對應的不同濃度的標準品溶液的峰面積之內,該標準品的稀釋倍數只是一個參考。若樣本中某一種核苷酸濃度過高,建議可稀釋后再測。
3. 建議采用鮮樣進行提取,提取后樣品中的ATP、ADP、AMP在室溫不太穩定,需盡快操作。