英文名稱 ： ATP、ADP、AMP Content HPLC Assay Kit
產(chǎn)品包裝 ： 盒裝
產(chǎn)品規(guī)格 ： 50T/48S
儲(chǔ)存條件 ： -20℃
檢測(cè)方法 ： 高效液相色譜法
有 效 期 ： 6個(gè)月
產(chǎn)品簡(jiǎn)介 ：
核苷酸具有重要的生物學(xué)功能，是一類由嘌呤堿或嘧啶堿、核糖或脫氧核糖以及磷酸三種物質(zhì)組成的化合物，主要參與構(gòu)成核苷。
三磷酸腺苷(ATP)被認(rèn)為是一種在所有生物體生存和繁殖的細(xì)胞合成中必不可少的普遍能量來源。ATP可通過多種細(xì)胞途徑產(chǎn)生。典型的如在線粒體中通過氧化磷酸化由三磷酸腺苷合酶合成，或者在植物的葉綠體中通過光合作用合成。ATP合成的主要能源為葡萄糖和脂肪酸。
二磷酸腺苷(ADP)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中。在生物體內(nèi)，通常為三磷酸腺苷(ATP)水解失去一個(gè)磷酸根，即斷裂一個(gè)高能磷酸鍵，并釋放能量后的產(chǎn)物。
一磷酸腺苷(AMP)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，是在機(jī)體內(nèi)由ATP與ADP釋放能量之后形成的。可以繼續(xù)結(jié)合磷酸基團(tuán)形成二磷酸腺苷(ADP)和三磷酸腺苷(ATP)。是ATP不完全水解的產(chǎn)物。
ATP、ADP、AMP在254nm下有吸收峰，可以利用高效液相色譜法根據(jù)不同的出峰時(shí)間和峰面積來測(cè)定不同核苷酸含量。
試驗(yàn)中所需的儀器和試劑：
高效液相色譜儀(C18柱(4.6×250mm)、紫外檢測(cè)器(VWD))、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、棕色EP管、0.45μm水系針頭式過濾器(50個(gè))、注射器、抽濾器、有機(jī)系濾膜、水系濾膜、2mL棕色進(jìn)樣瓶(50個(gè))、色譜純乙腈(500mL)、超純水。
注意事項(xiàng)：
1.測(cè)試完畢后，需要用高濃度的超純水相沖洗色譜柱(約20-30個(gè)柱體積)，以防阻塞色譜柱，按柱子的種類規(guī)范沖洗，防止損傷色譜柱。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋倍數(shù)要根據(jù)樣品中不同核苷酸的濃度確定，樣品中不同核苷酸的峰面積必須在其對(duì)應(yīng)的不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液的峰面積之內(nèi)，該標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋倍數(shù)只是一個(gè)參考。若樣本中某一種核苷酸濃度過高，建議可稀釋后再測(cè)。
3. 建議采用鮮樣進(jìn)行提取，提取后樣品中的ATP、ADP、AMP在室溫不太穩(wěn)定，需盡快操作。
