英文名稱 :β-Amylase(β-AL)Activity Assay Kit(Iodine-starch colorimetry)
產品包裝 :盒裝
產品規格 :100T/48S
儲存條件 :2-8℃
檢測方法 :微量法
有 效 期 :6個月
產品組成:
試劑名稱
|
規格
|
保存條件
|
試劑一
|
粉劑×1瓶
|
2-8℃保存
|
試劑二
|
液體15mL×1瓶
|
2-8℃保存
|
試劑三
|
液體30mL×1瓶
|
2-8℃保存
|
標準品
|
粉劑×1瓶
|
2-8℃保存
|
產品說明:
淀粉酶負責水解淀粉,主要包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。β-淀粉酶(EC3.2.1.2)從淀粉的非還原端切開α-1,4糖苷鍵,生成葡萄糖、麥芽糖、麥芽三糖、糊精等還原糖。
碘可以與未被淀粉酶水解的淀粉結合,生成在570nm下有特征吸收峰的復合物,其深淺可計算出淀粉酶的活力單位。α-AL耐熱不耐酸,β-AL耐酸不耐熱。根據上述特性,鈍化其中之一,就可測得另一種活性。
注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗,如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、蒸餾水。
注意事項:
吸光值大于1.5或者ΔA大于0.8時,可以對樣本進行適當稀釋后測定。
實驗實例:
1.取約0.1g藜葉片進行樣本處理,取上清液后按照測定步驟操作,用96孔板測得計算ΔAα=A5-(A1-A2)=1.065-
(0.849-0.220)=0.436,ΔA總=A5-(A3-A4)=1.065-(0.677-0.197)=0.585,帶入標準曲線y=2.628x-0.0051,計算x1=0.1678,x2=0.2245,按樣本質量計算酶活得:
β-淀粉酶活性(U/g質量)=0.2×x2÷W-0.2×x1÷W=0.2×0.2245÷0.1-0.2×0.1678÷0.1=0.1134U/g質量。