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雞白痢沙門氏菌PCR試劑盒

品牌:紀(jì)寧生物

貨號:JN32163

規(guī)格: 50次

聯(lián)系方式:021-54721350

立即詢價 說明書下載

產(chǎn)品詳情

雞白痢沙門氏菌PCR試劑盒
產(chǎn)品及特點(diǎn)
雞白痢沙門氏菌(Salmonella pullorum)是一種急性、系統(tǒng)性疾病,主要危害 1 周齡以內(nèi)雛雞,造成高死亡率;成年雞無明顯病變,多數(shù)呈隱形感染。雞白痢沙門氏菌病的潛伏期短,雛雞一般為 2—3 天,有時僅為 1 天。出殼后第 2 天就開始死亡,病雞精神萎頓,縮頭頸,閉眼昏睡,絨毛松亂,初期病雞僅表現(xiàn)食欲減少,繼而不食;腹瀉,排白色稀漿樣糞便,有糊堵肛門現(xiàn)象;嚴(yán)重者因呼吸困難或急性敗血癥而死亡。因此快速靈敏檢測雞白痢沙門氏菌具有重要意義。本產(chǎn)品就是為此目的根據(jù) PCR 原理開發(fā)的試劑盒,
1. 即開即用,用戶只需要提供DNA模板。
2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化,專一性強(qiáng),只擴(kuò)增雞白痢沙門氏菌,與其他病原沒有交叉反應(yīng)。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次,但只能用于科研。
規(guī)格及成分

編號

成分

規(guī)格

試劑一

PCR MagicMix 3.0

1 mL(紅蓋)

試劑二

超純水

1 mL(亮黃色)

試劑三

雞白痢沙門氏菌 PCR 引物混合液

100 μL(白蓋)

試劑四

雞白痢沙門氏菌 PCR 陽性對照(1×10E8 /μL)

50 μL(黃蓋)

試劑五

使用手冊

1 份

運(yùn)輸及保存
低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽性對照需要單獨(dú)放置,不要污染其他試劑。
自備試劑
樣品 DNA。
使用方法
一、樣品 DNA 的制備:
1. 用自選方法純化N+2個樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容。可以選用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N個樣品,則需要做N+2個提取,包括一個樣品制備陽性對照和一個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水(取決于試劑盒要求的樣品起始量)中加 10μL 雞白痢沙門氏菌 PCR 陽性對照的 1000 倍稀釋液而得,樣品制備陰性對照是直接用水。提取結(jié)束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、設(shè)置PCR反應(yīng)(40 μL 體系):
3. 對N+2個樣品,在PCR時需要增加一個PCR陽性對照和一個PCR陰性對照,故需要設(shè)置N+4個反應(yīng)。在N+4個PCR管中分別加入下列成分:

成份

N+2 個樣品管

PCR 陰性對照

PCR陽性對照

PCR Magic Mix 3.0

20μL

20μL

20μL

雞白痢沙門氏菌PCR 引物混合液

2μL

2μL

2μL

N+2個樣品DNA模板

18μL

--

--

PCR 陰性對照(水)

--

18μL

--

PCR 陽性對照(雞白痢沙門氏菌PCR陽性對照1000倍稀釋液)

--

--

18μL

4. 按下表設(shè)置 PCR 反應(yīng):

過程

溫度

時間

預(yù)變性

95℃

5 min

PCR 反應(yīng)35個循環(huán)

95℃

30 sec

55℃

30 sec

72℃

40 sec

最后延伸

72℃

7 min

三、電泳檢測:
5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在 擴(kuò)增結(jié)束后可以直接上樣,不需要另外再加 loading buffer。

PCR 產(chǎn)物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現(xiàn),陰性對照必須無任何擴(kuò)增,否則實(shí) 驗(yàn)無效。對沒有擴(kuò)增產(chǎn)物的樣品,可以稀釋 10 倍后重復(fù) PCR 擴(kuò)增以排除 PCR 抑制劑的感染。

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