摘要
流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期等,主要用于DNA染色。
流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期等,主要用于DNA染色。Propidium Iodide簡稱PI,又稱碘化丙啶,分子量為668.40,對人體有刺激性,本試劑中含Rnase A,RNase濃度200ug/ml。
產(chǎn)品介紹
碘化丙啶PI染色液(50μg/ml,含RNase)
產(chǎn)品簡介：
碘化丙啶染色
(PI stain)可以對細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡進(jìn)行分析。碘化丙啶(Propidium
Iodide
, PI)是一種可以嵌合到雙鏈DNA和RNA的堿基對中并與之結(jié)合的熒光染料，無堿基特異性。碘化丙啶與雙鏈DNA結(jié)合后可以產(chǎn)生熒光，并且熒光強(qiáng)度和雙鏈DNA的含量成正比。細(xì)胞內(nèi)的DNA被Propidium
Iodide
染色后，可以用流式細(xì)胞儀對細(xì)胞進(jìn)行
DNA含量測定，然后根據(jù)DNA含量的分布情況，可以進(jìn)行細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡的分析。碘化丙啶染色后，假設(shè)G0/G1期細(xì)胞的熒光強(qiáng)度為1，那么含有雙份基因組DNA的G2/M期細(xì)胞的熒光強(qiáng)度的理論值為2，正在進(jìn)行DNA復(fù)制的S期細(xì)胞的熒光強(qiáng)度為1～2之間。凋亡細(xì)胞由于細(xì)胞核發(fā)生濃縮以及發(fā)生DNA片段化
(DNA
fragmentation)導(dǎo)致部分基因組DNA片斷在染色過程中丟失，因此凋亡細(xì)胞碘化丙啶染色后呈現(xiàn)明顯的弱染，即熒光強(qiáng)度小于1，在流式檢測的熒光圖上出現(xiàn)所謂的sub-G1峰，即凋亡細(xì)胞峰。
細(xì)胞凋亡時(shí)，流式細(xì)胞檢測可呈現(xiàn)亞二倍體核型的特征，根據(jù)光散射的特點(diǎn)，
PI染色可以區(qū)分細(xì)胞凋亡和細(xì)胞壞死的細(xì)胞峰型。細(xì)胞凋亡時(shí)，出現(xiàn)凋亡細(xì)胞皺縮、染色質(zhì)濃縮、核碎裂，產(chǎn)生凋亡小體，使細(xì)胞的前向光散射低于正常。在細(xì)胞凋亡的早期，細(xì)胞對前向角光散射的能力顯著降低，對側(cè)向光散射的能力增加或沒有變化。在細(xì)胞凋亡的晚期，前向和側(cè)向光散射的信號均降低。細(xì)胞壞死時(shí)細(xì)胞多表現(xiàn)為細(xì)胞腫脹，因此前向光散射高于正常，對側(cè)向光散射高于正常。
碘化丙啶PI染色液(50μg/ml,含RNase)主要由PI、破膜劑、RNase等組成，經(jīng)常用于培養(yǎng)的貼壁或懸浮細(xì)胞的細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測， 亦可用于區(qū)分細(xì)胞凋亡和細(xì)胞壞死。PI染色液工作濃度為20～50μg/ml，推薦用于DNA染色，細(xì)胞檢測含量范圍一般為0.1～1×10
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之間。
