94413-64-6 / 2-氰基-4-吡啶羧酸甲酯的純度檢測和制備方法

背景及概述^[1-2]

托比司他用于治療痛風的慢性高尿酸血癥，與傳統藥物別嘌呤醇(嘌呤類似物)相比，不會影響嘌呤及吡啶代謝及其酶的活性，其降低尿酸的作用更強，不需要大劑量重復給藥，安全性更好，而2-氰基-4-吡啶羧酸甲酯為合成托比司他的重要原料。

純度檢測^[1]

2-氰基-4-吡啶羧酸甲酯合成過程中所產生的雜質主要有異煙酸甲酯和甲基異煙酸N-氧化物。

2-氰基-4-吡啶羧酸甲酯與主要雜質異煙酸甲酯極性相近，CN201610560075.4提供一種采用等度洗脫實現2-氰基-4-吡啶羧酸甲酯與相鄰雜質峰能完全分離，且峰型佳的方法，實現對2-氰基-4-吡啶羧酸甲酯含量的準確分析。本發明涉及的一種2-氰基-4-吡啶羧酸甲酯與其主要雜質完全分離的高效液相色譜純度檢測方法，包括以下步驟：

a、制備供試品溶液：取2-氰基-4-吡啶羧酸甲酯，用流動相或甲醇溶解，制成濃度為0.5mg/ml～1.2mg/ml的溶液，作為供試品溶液。

b、制備雜質對照品溶液：取異煙酸甲酯和甲基異煙酸N-氧化物，用流動相或甲醇溶解，制成濃度為0.5mg/ml～1.2mg/ml的溶液，作為雜質對照品溶液。

c、采用高效液相色譜分別對供試品溶液和雜質對照品溶液進行檢測，檢測條件為：色譜柱為C18柱；流動相為甲醇-緩沖鹽，甲醇與緩沖液的體積比為10％：90％～90％：10％；進樣量為：20ul，流速為0.5ml/min～1.5ml/min；柱溫為10℃～40℃；檢測波長為200nm～300mn。

d、按峰面積歸一化法計算異煙酸甲酯和甲基異煙酸N-氧化物的峰面積。

制備^[2]

向250ml三口瓶中加入甲基異煙酸-N-氧化物(15.31g，0.1mol)和200ml乙腈攪拌全溶后，加入三乙胺(15g，0.15mol)、三甲基硅氰(29.76g，0.3mmol)后氮氣保護回流反應20小時，TLC檢測反應結束。將溶劑減壓蒸餾至干，殘留物上硅膠柱層析，用二氯甲烷-甲醇(50：1)洗脫，得到白色結晶體收率13.48g，83.14％。¹HNMR(600MHz，DMSO-d6，δppm)：4.03(s，3H，)，8.11(d，1H，)，7.76(s，1H)，8.26(s，1H)，8.89(d，1H)。

參考文獻

[1][中國發明]CN201610560075.4一種2-氰基-4-吡啶羧酸甲酯與其主要雜質完全分離的高效液相色譜純度檢測方法

[2] [中國發明] CN201610150069.1 一種托匹司他雜質的合成方法