9005-64-5 / 吐溫20的應(yīng)用及測(cè)定方法

背景及概述^[1][2]

吐溫20 ( Tween 20) ，又稱聚山梨酯20 ( polysorbate20) ，是一種非離子表面活性劑，具有較強(qiáng)的親水性和化學(xué)上的不解離性，對(duì)藥物有較好的助溶作用，在藥物制劑中常添加其以增加有效成分的溶解度；另一方面，吐溫20 能抑制大分子蛋白藥物的自動(dòng)聚合，提高藥物的穩(wěn)定性。作為一種新型的非離子表面活性劑，聚山梨酯20具有穩(wěn)定性高，不易受強(qiáng)電解質(zhì)、酸、堿的影響，與其他類型表面活性劑能混合使用，相容性好的特點(diǎn)，在各種溶劑中均有良好的溶解性。因此，聚山梨酯20的消耗量也日趨增大。在使用過(guò)程中，含有聚山梨酯20的廢水不可避免地進(jìn)入了水體、土壤等環(huán)境。非離子表面活性劑對(duì)魚(yú)類和水生生物會(huì)產(chǎn)生毒性，影響其他共存有機(jī)物在環(huán)境中的遷移和降解，它們?cè)谕寥?沉積物上的吸附可限制其在土壤等有機(jī)污染增效修復(fù)方面的應(yīng)用。并且是隨著近年來(lái)藥理學(xué)研究的深入，人們認(rèn)識(shí)到聚山梨酯類表面活性劑具有一定生物和藥理活性，它能夠誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生脫顆粒作用，引起過(guò)敏活性物質(zhì)釋放，其本身的不飽和脂肪酸也十分容易氧化降解而產(chǎn)生多種有毒成分，與藥物臨床上出現(xiàn)的呼吸困難、惡心、嘔吐、皮疹等不良反應(yīng)相關(guān)。

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)^[3]

應(yīng)用^[4]

吐溫20可用作化妝品的乳化劑，橡膠乳液的潤(rùn)濕劑，染料的溶劑，醫(yī)藥品和照相乳液的乳化劑，泡沫塑料穩(wěn)定劑等。如有實(shí)驗(yàn)利用吐溫輔助水劑法提取花生油脂，將同時(shí)得到富含花生蛋白的水提液作為研究對(duì)象，以蛋白純度、殘油量、蛋白質(zhì)回收率和吐溫20含量為指標(biāo)，優(yōu)化花生蛋白粉的回收工藝，旨在獲得純度較高的花生蛋白粉。比較了堿鹽皂化、萃取和高速離心3種水提液脫脂處理方法，分別采用酸沉和膜分離回收花生蛋白。pH＜4.0 時(shí)，隨著pH 的升高，蛋白質(zhì)回收率顯著提高；pH 為4.5 時(shí)蛋白質(zhì)回收率達(dá)到最大，為93.17%；pH＞5.0 時(shí)，蛋白質(zhì)回收率顯著降低，最終確定酸沉最佳pH為4.5。隨著蛋白沉淀水洗次數(shù)的增加，蛋白質(zhì)回收率下降，但蛋白純度顯著上升，最終確定水洗蛋白沉淀2次。堿鹽皂化、萃取和高速離心3 種方法均可降低水提液油脂含量，而采用堿鹽皂化法處理水提液結(jié)合酸沉工藝，得到的花生蛋白粉純度最高為81.28%，殘油量5.18%，吐溫20 含量11.11%，蛋白質(zhì)回收率84.68%。采用5 kDa 超濾膜處理水提液制得花生蛋白粉純度77.35%，殘油量6.14%，吐溫20 含量6.36%，蛋白回收率97.45%。

測(cè)定方法^[2]

分光光度法分析非離子表面活性劑聚山梨酯20的方法，通過(guò)下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：

1)顯色反應(yīng)：由于聚山梨酯20的水溶液顏色很淺，需要選用適當(dāng)?shù)脑噭┡c其反應(yīng)生成有色化合物再進(jìn)行測(cè)定。碘作為一種電子受體能與聚山梨酯20分子中氧原子作用形成黃色絡(luò)合物。準(zhǔn)確稱取1gl2和2gKl，加蒸餾水溶解，定容至100mL。用Kl-l2的混合液做為顯色劑。配好的顯色劑應(yīng)避光低溫保存。

2)顯色條件：溶液最佳pH值范圍為4～8，顯色劑用量為0.25mL，顯色時(shí)間20min，最佳吸收波長(zhǎng)486nm，參比溶液為蒸餾水。

3)標(biāo)準(zhǔn)曲線：制作標(biāo)準(zhǔn)曲線的目的是建立方法的測(cè)量信號(hào)與待測(cè)物聚山梨酯20濃度之間的定量關(guān)系。準(zhǔn)確配制不同濃度的聚山梨酯20標(biāo)準(zhǔn)溶液。在試管中分別加入10mL已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，再加入0.25mL的顯色劑，搖勻，靜置反應(yīng)20min。用分光光度計(jì)在486nm處，使用1cm比色皿，以蒸餾水為參比測(cè)定各不同濃度聚山梨酯20及顯色劑空白的吸光值，兩者之差為不同濃度下溶液相對(duì)于試劑空白的吸光值。以濃度對(duì)吸光值作圖得到標(biāo)準(zhǔn)曲線。

4)聚山梨酯20含量的測(cè)定：在試管中加入10mL未知濃度的聚山梨酯20溶液，加入0.25mL的顯色劑之后搖勻，靜置反應(yīng)20min。用分光光度計(jì)在486nm處，使用1cm比色皿，記錄未知濃度聚山梨酯20的吸光值，將吸光值代入步驟(3)所建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，即可求出聚山梨酯20的含量。

主要參考資料

[1] RP-HPLC-ELSD 法測(cè)定康柏西普眼用注射液中輔料吐溫20 的含量

[2] CN201010181032.8一種聚山梨酯非離子型表面活性劑的測(cè)定方法

[3] 日用化工原料手冊(cè)

[4] 吐溫輔助水劑法提取花生油過(guò)程中蛋白質(zhì)的回收研究