9002-07-7/無動物源性胰蛋白酶/EDTA

產(chǎn)品描述

無動物源性胰蛋白酶/EDTA是一種重組酶，可以替代動物胰腺來源消化塑料培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞。本產(chǎn)品比天然胰蛋白酶制劑具有更高的特異性，適用于無血清培養(yǎng)體系中貼壁細(xì)胞的消化。本產(chǎn)品溶劑為PBS/1mM EDTA，是即用型產(chǎn)品。本品不含酚紅。

產(chǎn)品使用

1.將無動物源性胰蛋白酶/EDTA和完全培養(yǎng)基于37℃復(fù)溫。

2.將待消化的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基上清吸棄。

3.用5 ml無鈣鎂離子的PBS清洗細(xì)胞層并棄去洗液。

4.在培養(yǎng)瓶中加入適量的無動物源性胰蛋白酶/EDTA（例：75cm2培養(yǎng)瓶中加入5ml消化液），保證貼壁細(xì)胞層完全被消化液浸沒。

5.37℃孵育，直至細(xì)胞被消化下來（使用倒置顯微鏡觀察，保證細(xì)胞完全被消化下來）可以輕拍瓶底，幫助細(xì)胞解離。

6.在培養(yǎng)瓶中加入5-10ml的完全培養(yǎng)基，各個角度傾斜培養(yǎng)瓶沖洗，然后將液體轉(zhuǎn)入15ml離心管。

7.100g離心5-10min。

8.去上清后用2-5ml復(fù)溫的完全培養(yǎng)基重懸。

9.確定細(xì)胞濃度及活率。

10.根據(jù)細(xì)胞特性以一定的濃度接種細(xì)胞，即可進(jìn)行培養(yǎng)。