手機掃碼訪問本站
微信咨詢
玻璃酸酶又名透明質酸酶,在哺乳動物的睪丸里含量很豐富,能水解透明質酸,使其粘滯性明顯下降,有利于受精時精子進入卵子,也存在于精子、頜下腺、蜂毒、蛇毒、皮膚、脾臟、水蛭及細胞的溶酶體中。藥用玻璃酸酶為白色或微黃色粉末,無氣味,易溶于水,不溶于 丙酮、乙醚、乙醇等有機溶劑。生化制藥主要用牛、羊睪丸為原料進行提取制備。
一種玻璃酸酶的提取方法,采用酸液提取和硫酸銨鹽析得玻璃酸酶粗品,粗品再經透析、熱原處理、凍干得玻璃酸酶精品。具體步驟如下:
1提取:
將羊睪丸除內外皮層及付睪丸,絞成糜漿。稱取糜漿,按每1kg 糜漿加酸液1.0-1.5L的比例,加酸液攪拌,浸出4小時后,將浸出液過濾,濾液調pH3.0~4.5。
取濾渣,按每1kg開始加入的糜漿加酸液0.2-0.3L的比例,加酸液攪拌1小時后,再次過濾,濾液調pH3.0~4.5。
2粗制:
合并兩次過濾液,在不斷攪拌下,以每1L加硫酸銨200-230克的比例,加入固體硫酸銨,攪拌溶解,靜置12小時,過濾,留固體。 量取濾液,在不斷攪拌下,按1L濾液加硫酸銨270-300克的比例,加入固體硫酸銨,攪拌溶解,靜置12小時,過濾,合并兩次固體, 得粗品。
3精制:
3.1透析
粗品溶于少量水中,調pH3.5~5.0,以透析袋包扎,在磷酸鹽- 檸檬酸緩沖液中透析24小時。
3.2熱原處理:
將透析液離心20-60分鐘,轉速3000-4000r/mi n,過濾,將濾液放冰浴中冷卻,加入濾液0.1體積的15%磷酸三鈉(Na3PO4·12H2O) 溶液,在不斷攪拌下,緩緩加入濾液0.06體積的20%醋酸鈣 (Ca(CH3COO)2·H2O)溶液,并以NaOH溶液調pH8-9,離心,時間 20分鐘~60分鐘,轉速3000-4000r/min。收集上清液,之后上清液 調pH6.5~7.0。
3.3凍干
將濾液冷凍干燥,即得無熱原的玻璃酸酶精品。
玻璃酸是存在于人體組織間基質中的粘多糖,能限制細胞外液的擴散。玻璃酸酶作用于玻璃酸分子中的葡萄糖胺鍵,使之水解和解聚,降低體液的粘度, 使細胞間液易流動擴散,故可使局部積貯的藥液、滲出液或血液擴散,加速藥物吸收,減輕局部組織張力和疼痛,并有利于水腫、炎性滲出物的吸收、消散。本品屬關節軟骨的基本成分之一,具有營養、保護和維持關節軟骨的功能。
用于促使眼局部積貯的藥液、滲出液或血液的擴散,促使玻璃體混濁的吸收、預防結膜化學燒傷后瞼球粘連,并消除有關的炎癥反應; 用于骨關節炎的治療。
[1] CN201210598018.7 一種玻璃酸酶的提取方法
[2] 注射用玻璃酸酶說明書