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831-61-8 / 沒食子酸乙酯的應用

背景及概述[1][2]

狼毒大戟( Euphorbia fischeriana) 為大戟科狼毒屬植物,主產于中國北方,俗稱貓眼草。始載于《神農本草經》,其味辛、性平,有大毒,具有逐水祛痰,散結殺蟲的功效,臨床上用于腫瘤、結核病、皮膚病的治療。國內外學者經大量科學研究證實,狼毒大戟對腫瘤細胞抑制作用強,抗瘤譜廣,副作用小,具有一定的研發價值。沒食子酸乙酯( Ethyl gallate,EG) 是狼毒大戟干燥根中提取物的主要成分,白色結晶粉末;溶點149~153℃。是一種用途廣泛的精細化工產品,主要應用在有機合成、食品、輕工業和電子工業。

傳統的沒食子酸乙酯的合成方法是以沒食子酸與乙醇為原料,用濃硫酸為催化劑和脫水劑,在100℃和條件下進行酯化反應和回收乙醇,得到沒食子酸乙酯粗品,再經洗滌、重結晶與脫色、冷卻離心、干燥等工序得到沒食子酸乙酯成品。

該合成方法存在的主要缺點是,沒食子酸乙酯的成品得率很低,僅為60~70%,因此產品成本費用很高,造成成品得率低的主要原因有兩個:一是在酯化反應體系中,濃硫酸既是催化劑和脫水劑,用量很大約為0.3~0.4(沒食子酸:濃硫酸的質量比為1:0.3~0.4),濃硫酸又是強氧化劑,由于酯化反應是在較高的溫度條件下進行的,因此濃硫酸對參與反應的原料沒食子酸和反應生成物沒食子酸乙酯同時起到極強的氧化作用,甚至燒焦;二是酯化反應中生成的水不能被脫水劑濃硫酸全部吸附,因此當反應體系達到平衡時,酯化反應難以向正方向進行,直接影響沒食子酸的轉化率。如何解決現有技術所存在的問題,已成為精細化工領域中待解決的難度較高的研究課題。

應用[3-5]

1. 抗腫瘤:沒食子酸乙酯對肝癌、胃癌、乳腺癌具有抑制生長的作用,實驗采用硅膠柱色譜法、Sephadex LH-20 凝膠柱色譜法和半制備高效液相色譜法從狼毒大戟中提取分離沒食子酸乙酯,具有較高純度,并通過體外抗腫瘤活性的篩選證實,沒食子酸乙酯為狼毒大戟的抗腫瘤活性成分之一。對 LOVO、A549、CAL-27 細胞均具有抑制腫瘤細胞增殖作用,且該藥物對不同細胞的作用存在差異,其中對 LOVO 細胞作用最顯著。

還有實驗室從狼毒大戟干燥根中提取到沒食子酸乙酯(EG),以人乳腺癌雌激素受體不表達,即 ER-MDA-MB-231 細胞和雌激素受體表達,即 ER+ MCF-7 細胞為研究對象,結果表明 EG 可通過下調凋亡抑制蛋白 Bcl-2 表達,上調促凋亡蛋白 Bax 表達,表明 EG可下調 Bcl-2 /Bax 表達誘導 MDA-MB-231 細胞凋亡,從而抑制乳腺癌細胞增殖。EG 也是狼毒大戟治療乳腺癌的一個非常重要的生物活性成分之一。

此外,還有研究表明沒食子酸乙酯用于結腸癌細胞Lovo凋亡藥物的應用,主要解決目前結腸癌化學治療毒副作用嚴重的問題;沒食子酸乙酯能有效的抑制結腸癌細胞增殖,誘導結腸癌細胞Lovo發生凋亡,并考察其作用靶點發現,其可上調caspase-3、caspase-8、caspase-9的表達,此化合物誘導結腸癌細胞的作用機理與激活線粒體通路和死亡受體通路密切相關,沒食子酸乙酯毒性小,安全性高,本發明尋找到沒食子酸乙酯抑制結腸癌增殖的作用機理與作用靶點,為沒食子酸乙酯作為藥物進入臨床提供了理論依據。

2. 止瀉作用:有研究表明以沒食子酸乙酯作為活性成分或唯一活性成分用于制備止瀉藥物。沒食子酸乙酯可明顯抑制小鼠離體腸平滑肌收縮,可明顯降低小鼠稀便率,可明顯降低糖尿病大鼠血清胃動素、胃泌素水平,改善腸道功能,說明沒食子酸乙酯具有顯著的止瀉作用,可望作為活性成分用于制備止瀉藥物,尤其是可望用于制備治療腹瀉或糖尿病胃腸功能紊亂的藥物,具有廣泛應用前景。

制備[2]

一種沒食子酸乙酯的合成方法,它不僅能夠大幅提高沒食子酸乙酯成品得率,而且反應無帶水劑,節約成本,降低單耗;該合成工藝穩定可靠、純度大于99.5%。

技術方案如下:以沒食子酸、無水酒精和濃硫酸(含量≥98.0%)為原料,在反應釜內進行酯化,生成的水和乙醇混合蒸汽進入反應釜直接相聯的精鎦塔內進行分離,控制回流比2~1.5:1,使塔頂溫度控制在80~85℃,鎦出的乙醇返回反應釜內繼續反應,而精鎦塔底部的冷卻物(水和乙醇混合物)經恒壓滴漏斗(內裝有吸水3A分子篩)再進入反應釜內繼續反應,酯化反應8~10小時后,蒸餾回收乙醇,回收完乙醇后加軟水冷卻結晶、粗離心得到沒食子酸乙酯粗品;粗品在去離子水中溶解,用活性炭脫色、精過濾、精結晶、精離心得沒食子酸乙酯精品、干燥得沒食子酸乙酯成品。

所述原料沒食子酸與無水酒精和硫酸的投料比為:重量g:體積ml:重量g=1:4~5:0.1~0.2;所述酯化反應釜直相聯精餾塔:精餾塔具有15~20個理論塔板數。塔頂溫度在80~85℃。所述分子篩:分子篩是3A分子篩,使用前必須在干燥箱中干燥至無水;3A分子篩用量是裝入恒壓滴漏斗內200~250ml,(沒食子酸與3A分子篩用量比重量:體積=1:2~2.5)。所述酯化反應溫度:酯化反應溫度控制在85~90℃。

反應原理是:在酯化反應體系中,反應生成的水與乙醇形成二元共沸物,共沸物經過反應釜直接相聯的精鎦塔內進行分離,鎦出的乙醇返回反應釜內繼續反應,而精鎦塔底部的冷卻物(水和乙醇混合物)經恒壓滴漏斗(內裝有吸水3A分子篩)再進入反應釜內繼續反應,將反應生成的水不斷帶出反應系被分子篩吸附,使反應向正式方向進行,直至反應完全;因濃硫酸在此反應中只作催化劑,用量降低,它對參與反應原料沒食子酸和反應生成物沒食子酸乙酯的氧化作用極其微弱,因此有利于酯反應的正向進行;同時整個酯化反應過程蒸餾回收乙醇過程在較低溫度下進行,也有利于減小原料沒食子酸和反應生成物沒食子酸乙酯的氧化作用,有利于提高酯化反應的轉化率。

沒食子酸乙酯的應用

主要參考資料

[1] 簡白羽, 郭麗娜, 馬立威, 韓翠翠, 楊瑩, & 劉吉成. (2014). 狼毒大戟中沒食子酸乙酯的提取分離及抗腫瘤活性.中醫藥信息, (3), 7-9.

[2] CN201410360026.7一種沒食子酸乙酯的合成方法沒

[3] 食子酸乙酯對乳腺癌細胞生長的影響

[4] CN201811155239.0一種沒食子酸乙酯的用途

[5] CN201510652559.7沒食子酸乙酯用于制備治療人結腸癌凋亡藥物的應用