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65666-07-1 / 水飛薊素的制備方法

背景及概述[1]

水飛薊素具有抗肝中毒、保護肝細胞膜、改善肝功能的藥理活性,臨床用于治療肝炎、 膽囊炎等。近年來研究發現,水飛薊素不僅具有保肝利膽作用,而且還具有明顯的抗脂質過 氧化、抗輻射、清除自由基和抗胃潰瘍等作用,并且毒性小、無致畸和誘變作用,在降血脂、 防治動脈粥樣硬化、預防腦缺血和抗血小板聚集等方面具有較好的效果,水飛薊素很有可能 成為防治心腦血管疾病的良好藥物。

水飛薊素的制備方法

制備[1-2]

報道一、

a、選擇籽粒飽滿的水飛薊籽,清洗烘干,用機械軋油機采用三 級壓榨法進行壓榨,100斤水飛薊籽可壓榨出15斤油,壓榨后的粕進 行粗粉,備用;

b、投料,每罐投入1.5噸粗粉后的水飛薊粕,按1∶4的比例加入 丙酮,即1噸水飛薊粕加入4噸丙酮,用提取罐和濃縮罐進行物料回流 提取10小時,物料溫度控制在25度,同時用冷凝器回收丙酮溶劑;

c、將溶劑過濾,濃縮2小時,溫度60度,蒸氣壓力1.5兆帕, 同時用冷凝器回收丙酮溶劑,得到糊狀浸膏;

d、將浸膏放到夾套鍋內,加入1∶5的凈化純凈水,即1公斤浸 膏加入5公斤水,水溫加熱到80度,攪拌1小時,放掉水,這樣反 復重復6次;

e、將水飛薊浸膏放到真空干燥罐內,進行真空干燥,干燥溫度 120度,負壓0.8兆帕,連續進行4?6小時,得到含水量在5%左右 的水飛薊素的干粉塊,將其粉碎成80?90目;

f、再將粉碎后的水飛薊素放入真空罐中進行二次真空,干燥2 ?4小時,溫度80度,負壓0.8兆帕,即得水飛薊素干粉。

報道二、

1.復合微生物發酵劑凍干粉的制備過程

1.1原菌種活化

分別量取0.9%的生理鹽水10ml于2只試管內,經121℃滅菌20分鐘冷卻至28℃,將2 株菌安瓶內的凍干菌粉末在無菌狀態下全部倒入0.9%的生理鹽水中,震蕩使其溶解,在28 ℃恒溫箱中靜止活化30分鐘,備用。

1.2發酵菌擴大培養

1.2.1母發酵劑的制備

分別量取2株菌培養基各200ml于2只500ml三角瓶內,121℃滅菌20分鐘冷卻至28℃, 按培養基體積的10%接種1.1步驟中已經活化的菌種,在28℃、搖床轉速150轉/分鐘條件下 搖床培養24小時,作為母發酵劑。

1.2.2生產發酵劑的制備

首先配制質量百分比濃度為10%的脫脂奶乳濁液,分裝于2只500mL三角瓶內,每瓶 200mL,121℃滅菌20分鐘冷卻至28℃,分別按2%體積比例接種母發酵劑,28℃、搖床轉速 150轉/分鐘條件下搖床培養48?52小時,檢測2株菌發酵液活菌數,各發酵液活菌數≥109 個/ml,視同為發酵成熟,如果活菌數<109個/ml,繼續培養,直至達到109個/ml。

1.3粉末凍干菌種的制備

將成熟的生產發酵劑在無菌條件下導入玻璃安瓶中,液面高度低于1cm,加蓋瓶塞后放 入?30℃冰柜速凍,凍結后將玻璃安瓶用托盤乘裝,放入凍干機進行冷凍干燥,制備粉末凍干 菌種。

1.4復合微生物發酵劑凍干粉的制備

按各粉末凍干菌種重量,取A菌粉末3份,B菌粉末2份,充分混勻后制成復合微生物 發酵劑凍干粉。

2.水飛薊素的制備

2.1水飛薊種子預處理

取水飛薊種子經機械粉碎后,用螺旋式榨油機榨油,得去油種子餅粉,加水調整去油種 子餅粉水分含量為40%~45%,按濕去油種子餅粉重量的4.2%~4.8%添加蔗糖,充分混勻后, 121℃滅菌20分鐘冷卻至28℃,制成發酵培養基,備用。

2.2復合微生物發酵劑凍干粉活化

首先配制質量百分比濃度為2%的葡萄糖溶液1千克,取5克復合微生物發酵劑凍干粉, 25℃~28℃條件下完全溶解于1千克葡萄糖溶液中,制成復合微生物菌懸液,靜止狀態下活 化30分鐘。

2.3發酵

將經過2.2步驟活化后的復合微生物菌懸液1千克,均勻接種在10千克經過2.1步驟預 處理的發酵培養基上,然后將接種后的發酵培養基平攤在無菌盤中,培養基厚度12cm~15cm, 25℃~28℃條件下保溫發酵60小時。

2.4干燥

將經過2.3步驟發酵處理的培養基75℃~80℃熱風干燥,邊干燥邊攪拌,使發酵后的培 養基水分含量低于5%。

2.5提取

將2.4步驟處理的物料超微粉碎,過100目篩,按重量體積比為1g∶15mL的比例取過篩 后的粉末加入無水乙醇,在15℃~20℃、真空度為?0.1MPa條件下提取10h,膜分離后取上 清液減壓蒸餾回收乙醇,得黃色粉末狀物質,按1g∶5mL的比例加甲醇溶解,經過濾后取不溶物真空干燥,得水飛薊素。

參考文獻

[1] [中國發明] CN201010600010.0 一種低溶殘高含量水飛薊素的加工提取方法

[2] [中國發明] CN201210062208.7 一種水飛薊素的制備方法