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632-85-9 / 漢黃芩素的提取制備方法

背景及概述[1]

漢黃芩素有抗癌、抑菌、利尿、解痙、清熱、止痛等作用。漢黃芩素為黃芩提取物,黃芩為常用中藥,有清熱瀉火、解毒、止血、安胎等作用,其有效成分為黃酮類。目前從黃芩中提取并鑒定出結構的黃酮類成分已有十幾種,主要包括黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素、千層紙素等。

漢黃芩素的提取制備方法

制備[1-3]

報道一、

取黃芩藥材,粉碎過10目篩,加水浸泡4小時,濾過,藥渣加入15倍量的乙醇70℃提取2次,每次2小時,,濾過,合并濾液,減壓濃縮成相對密度1.05~1.15(40℃測)的濃縮液,將濃縮液置入大孔吸附樹脂分離柱中,采用濕法裝柱,用蒸餾水洗滌樹脂柱至水洗液呈無色,水洗液棄去,用95%乙醇以進行洗脫,收集第二條黃色帶的洗脫液,減壓濃縮至相對密度1.05~1.15(40℃測)地濃縮液。然后采用高速逆流色譜分離濃縮液,在室溫下分別將系統1(正己烷-丙酮-乙醇-水=6∶4∶4∶9),系統2(正己烷-正丁醇-乙醇-水=2∶6∶5∶5)置于兩個分液漏斗中振搖,放置,分別取上、下相,將上相作為固定相,下相作為流動相,將固定相泵入色譜柱中,使柱中充滿固定相后,再讓儀器以800r/min轉動,同時將流動相以2.0ml/min的流速泵入。待流動相從出液端流出且兩相在色譜中達到動態平衡后,將樣品溶液注入色譜系統中,同時在出液端接紫外檢測器。在274nm波長處對流出液連續檢測,與漢黃芩素標準圖譜對應,收集液蒸除溶劑,干燥,得樣品。

報道二、

取黃芩藥材20kg粉碎成粗粉,加水潤濕,并于20~30℃保溫過夜,用乙醇回流提取三次。減壓回收乙醇至無乙醇蒸出,殘余物加入85%的乙醇,加熱使大部分溶解,過濾,濾液用柱層析用硅膠,以柱層析法進行分離,用石油醚與氯仿1∶3洗脫,收取第二條黃色帶,即得漢黃芩素約100g,經純度檢查,主要為漢黃芩素(含量大于90%),還含有少量黃芩素、千層紙素和白楊素化合物(含量小于10%)。

報道三、

步驟1、同時提取:取黃芩飲片,加12質量倍水加熱回流提取2h,提取液過濾,濾渣加10倍量水再提取2次,每次1.5h,合并濾液,獲得黃芩苷、黃芩素和漢黃芩素的混合粗提液。

步驟2、分離:將上步粗提液減壓濃縮至每1mL含0.2g生藥,以4BV/h的流速上樣D101大孔吸附樹脂柱,上樣量為1BV,先以水洗脫至流出液無色,依次以10BV60%乙醇,6BV80%的乙醇分別洗脫,收集60%的乙醇洗脫液,主要成分為黃芩苷,收集80%的乙醇洗脫液,主要成分為黃芩素和漢黃芩素。將黃芩苷類洗脫液濃縮成每mL含0.5g生藥,用2mol/L鹽酸調節pH值至2,80℃保溫0.5h,靜置12h,減壓濾過,沉淀水洗至pH值至5.0,再用少量乙醇洗滌,揮盡乙醇,減壓干燥,即得黃芩苷,液相色譜面積歸一化法測得其純度為95%,以黃芩中所含黃芩苷計提取率為87%。將黃芩素、漢黃芩素的混合洗脫液蒸干,所得黃芩素、漢黃芩素的混合物以少量無水甲醇溶解,上sephadexLH-20凝膠柱,每mL凝膠上樣20~50mg混合物,上樣體積為凝膠柱體積的3~5%,以無水甲醇洗脫,待凝膠柱上黃色條帶下移至柱底端開始分段接流分,每份10mL,視液相色譜結果合并流分,揮干溶劑,即得黃芩素、漢黃芩素純品,液相色譜面積歸一化法測得他們的純度分別為99%和97%,以黃芩中所含黃芩素計黃芩素提取率為88%,以黃芩中所含漢黃芩素計漢黃芩素的提取率為92%。

參考文獻

[1][中國發明]CN200710015979.X一種提取分離高純度漢黃芩素的制備工藝

[2][中國發明,中國發明授權]CN200310110337.X漢黃芩素的提取工藝、藥用組合物及制劑制備工藝

[3][中國發明,中國發明授權]CN201510086688.4一種從黃芩中同時提取黃芩苷、黃芩素和漢黃芩素的方法