手機掃碼訪問本站
微信咨詢
雌二醇,[17β-雌二醇或雌-1,3,5(10)-三烯-3,17-二醇,(17-β)],是分子量為272.38道爾頓的C18甾體激素。它是性激素,稱為“雌性”激素(也存在于雄性中),其是一組內源甾體中最有效的雌激素,其包括雌酮(E1)和雌三醇(E3)。在女性中,主要由卵巢產生雌二醇,由腎上腺次級產生,并在脂肪組織中將甾體前體轉化至雌激素。雌二醇負責乳腺和生殖上皮的生長以及第二性征的發育。除了促進健康的骨結構和調節女性膽固醇水平外,雌二醇的正常水平提供適當的排卵、受孕和妊娠。在男性中,睪丸和腎上腺是雌二醇的主要來源。雌二醇被需要用于維持激素平衡和其他腺體的功能。
浮2g(7.4mmol)雌酮在10ml水中,加入0.11g(0.37mmol)二甲基二辛 基氯化銨、0.4g(7.4mmol)KBH4,在油浴55℃中機械攪拌3小時。將反應物過 濾,粗品用甲醇重結晶得到β-雌二醇1.84g,收率91%。m.p.178-179℃,氫核 磁共振譜(400MHz,CDCl3)δ:7.95(m,1H,-OH),7.06(d,J=8Hz,1H,1-H) 6.53-6.61(m,2H,2-H,4-H),3.67(m,1H,17-H),0.73(s,3H,18-H)。
一種利用納米金淬滅羅丹明B熒光法檢測17β-雌二醇的方法,具體步驟如下:
(1)建立已知17β-雌二醇濃度的檢測體系的步驟,取11支分別加入20 μL,1 μmol/L 17β-雌二醇功能核酸適配體的離心管,加入100 μL納米金溶液,充分混勻后將離心管置于25℃條件下孵育20 min,然后分別加入10μL不同濃度的17β-雌二醇溶液和丙磺酸緩沖液,使得整個檢測體系中17β-雌二醇溶液濃度維持在1000 nmol/L以下,充分混勻后再將離心管置于25℃條件下孵育20 min,在上述混合液中加入35 μL、2 mol/L的氯化鈉溶液和25 μL、200 μmol/L的羅丹明B溶液,充分混勻,使得檢測體系溶液總體積達到500 μL,留作以下測定用;
(2)另取1支離心管將17β-雌二醇溶液用10 μL超純水替代,按照上述步驟(1)的方法處理后作為空白對照體系溶液;
(3)分別取500 μL步驟(1)和步驟(2)制備的標準溶液和空白對照液,置于石英熒光比色皿中,所述的石英熒光比色皿的內徑為0.5 cm × 0.5 cm,外徑為1.0 cm × 1.0 cm,用熒光光度計進行掃描測定信號,掃描條件為:激發光狹縫為10 nm,發射光狹縫為2.5 nm,激發光波長為520 nm條件下掃描,獲得其熒光光譜信號,17β-雌二醇和空白對照液的熒光強度信號分別為F和F0,計算增強的熒光強度值F=F-F0;
(4)以不同濃度17β-雌二醇(CE2)與對應增強熒光強度值F作圖,繪制標準曲線;
(5)制備樣品檢測體系:取10μL待測樣品,加入到步驟(1)方法制備的檢測體系離心管中,充分混勻后再將離心管置于25℃條件下孵育20 min后,在混合液中加入30μL、2mol/L的氯化鈉溶液和25 μL、200 μmol/L的羅丹明B溶液,混勻至檢測體系總體積達到500μL,按步驟(3)方法測定熒光信號并計算?F。
(6)根據計算所得的F值,查標準曲線,可以求得樣品中17β-雌二醇含量。
(7)驗證:用本發明方法測定含17β-雌二醇濃度分別為300nmol/L、500nmol/L、和1000 nmol/L的水樣各一份,得到的平均回收率范圍為94.6%-100.6%,從而證明了本方法的可靠性。
(8)采用本方法測定水樣中17β-雌二醇的濃度范圍為0-1500nmol/L,線性擬合直線方程為y=0.983x+2.69,最低檢測限為0.51 nmol/L。
[1] [中國發明] CN201110187224.4 雌二醇及雌二醇苯甲酸酯的綠色還原制備方法
[2] [中國發明,中國發明授權] CN200880125151.2 通過質譜法檢測雌二醇的方法