5373-11-5 / 木犀草苷的制備

背景及概述^[1][2]

木犀草苷是一種天然的黃酮類物質，在植物中分布廣泛，在多種藥物中也含有木犀草苷，如雙黃連口服液，清咽含片，抗感膠囊等。但這些藥物中都是含有多種有效成分，單一含有木犀草苷的藥物現在市面上沒有。木犀草苷是一種存在于天然植物中的一種黃酮苷類化合物，具有鎮咳和祛痰作用。木犀草苷有較強的呼吸道殺菌作用，它是新疆特有藥材青蘭中治療氣管炎的主要有效成分。降低膽固醇在動脈粥樣硬化中的作用，增強毛細血管的舒張作用。

木犀草苷鄰二酚羥基的特殊結構賦予了它抗氧化、抗腫瘤、抗感染、解熱抗炎等藥理活性，近年來研究表明，木犀草苷具有多種藥理活性，對呼吸系統、心血管系統、中樞神經系統疾病均有不同程度的治療作用，如降低膽固醇、增強毛細血管舒張、殺菌，以及抗病毒、抗腫瘤、抗氧化等，臨床主要用于止咳、祛痰、消炎、治療心血管等疾病。由于中藥金銀花的化學成分復雜，使得木犀草苷的提取和分離存在較大困難

結構

生物活性及應用^[3]

1.呼吸系統保護作用

木犀草苷化學名為木犀草素-7-O -葡萄糖苷(Luteolin-7-O -glucoside)，其苷兀為木犀草素，因其鄰二酚羥基特殊的化學結構，使其具有清除自由基的抗氧化活性，對枯草桿菌、金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、啤酒酵母等在不同濃度下有抑菌活性，且能對抗呼吸道病毒、副流感3 型病毒和流感A 型病毒，因此具有較強的呼吸道殺菌作用，臨床上已驗證對治療喘、痰癥狀有療效。

采用細胞并變法進行了抗呼吸道病毒感染的研究，結果發現木犀草苷具有很強的抗呼吸道合胞體病毒的活性，其半抑制濃度(IC50)為5 . 2滋g/m L ，治療指數為48.1，高于陽性對照藥病毒唑，另外木犀草苷具有一定強度的抗副流感3型病毒的活性，其治療指數為6 .0 。

2.心血管保護作用

木犀草苷的抗氧化活性能夠減輕阿霉素誘導產生的自由基對心肌細胞的損傷。木犀草苷通過與血栓素A2 受體結合抑制血小板功能，并通過監測P I3K活性抑制血管內皮生長因子誘導的血管生成，可能成為預防和治療動脈粥樣硬化的潛在治療劑。木犀草苷能明顯降低乳酸脫氫酶(LDH )的釋放，上調抗凋亡蛋白FGFR 2和LIF 表達，激活PI3K/Akt途徑，同時增加BAD 磷酸化Bax ，縮小Bcl-2 的比例，減少梗死面積，降低心肌細胞凋亡率和心律失常發生率，從而改善心臟功能。

3.抑菌、抗炎、抗病毒作用

通過測定銅綠假單胞菌質控菌株和多耐藥菌株的體外抑菌作用，初步確定了木犀草素具有明顯的抑菌作用。金銀花中木犀草苷影響大腸埃希菌和金黃色葡萄球菌細胞內的核酸，使得DNA 復制和RNA 合成無法完成，影響蛋白質的合成和表達，從而起到抑菌的作用，還可以降低肝纖維化程度，并具有抗炎的功效，同時能夠抑制單純皰疹病毒性角膜炎、流感病毒性肺炎、甲型流感病毒、豬繁與呼吸綜合征病毒、新城疫病毒、呼吸道合胞病毒、流行性感冒和人巨細胞病毒等，從而達到抗病毒的功效。

4.抗腫瘤作用

目前，木犀草苷在抗腫瘤方面的研究較為普遍和廣泛。木犀草苷可以通過抑制SGLT1 的葡萄糖轉運，從而起到抗癌作用，也可以通過抑制細胞內某些激酶的活性間接地抑制腫瘤細胞增殖。有文獻報道，通過熱穩定實驗，評價木犀草苷對1 4株癌細胞的體外增殖抑制作用，發現木犀草苷可通過下調Hsp9 0 的客戶蛋白Raf- 1、HER 2 的表達，抑制H sp90 的活性，選擇性地抑制非小細胞肺癌的增殖，誘導非小細胞肺癌凋亡，從而發揮抗腫瘤的作用。

0.1% DMSO 溶液中，木犀草苷的抑癌性強于木犀草素，1.15x 10< mol/L 木犀草苷水溶液的抑癌效果是木犀草苷0.1% DMSO 溶液的1.87倍，可能原因是木犀草苷易溶于水的性質增強了木犀草苷與葡萄糖轉運體的親和性。研究表明，給藥木犀草苷使HeLa 和SW 2 0 細胞內的磷酸化組蛋白含量降低影響極光激酶B 的活性，從而抑制HeLa 和SW20 細胞增殖，起到抗腫瘤的作用。

5.抗皮膚老化、抗局部缺血作用

木犀草苷降低膠原蛋白的分解和減少纖維細胞中MMP-1 的合成，可能成為一種有效的抗皮膚老化治療劑。不同濃度木犀草素增加皮膚成纖維細胞中I型和芋型膠原蛋白含量，對MM P- 1 蛋白表達有顯著的抑制作用，并成濃度梯度依賴性。在探討木犀草苷對心肌功能的影響中，發現木犀草苷在改進抗缺血特性相關缺血邊緣心肌灌注部位的過程中，具有抗局部缺血的功效，可能是因為其抗氧化性質而發揮的藥效。

制備^[3]

1.溶劑提取法

由于木犀草苷可溶于熱水、熱甲醇及乙醇的性質大多采用水或醇溶液作為溶劑的提取方法。比較水回流和7 0 % 乙醇超聲法對木犀草苷含量的影響，結合高效液相色譜法(HPLC )對兩種提取樣進行了含量測定，結果表明兩種提取方法中木犀草苷的含量分別為0.01%和0.061%，且70 % 乙醇溶液提取的木犀草苷含量是水提法的6 .1 倍，所以醇溶液的提取方法略優于水提取方法。

2.超聲提取法

回流提取一般都在較高的溫度下進行，容易影響物質有效成分的活性或導致有效成分的損失，2005版藥典規定以超聲法作為木犀草苷的提取方法。嗵過正交試驗優化比較加熱回流與超聲兩種醇提方法對金銀花藥材中綠原酸和木犀草苷的影響，結果表明以木犀草苷轉移率為指標，超聲法略優于回流法。

3.閃式提取法

考慮到超聲和回流方法耗時較長，提出一種快速的生物活性成分提取方法一閃式提取法。分別以綠原酸和木犀草苷得率為指標，比較回流法、超聲法及閃式提取法，結果表明，閃式提取法木犀草苷含量約為回流法的2 倍，超聲法略高于回流法，且分別以綠原酸、木犀草苷含量為指標，確定單獨以木犀草苷或綜合考慮綠原酸和木樨草苷含量兩個指標時的最佳提取工藝為15倍量6 0 % 乙醇提取1 min。

比較閃式提取法和超聲提取法分別提取金銀花及其葉中的綠原酸和木犀草苷的含量，建立高效液相色譜-二極管陣列檢測器分析方法進行評價，結果表明閃式提取3 min ，金銀花及其葉中綠原酸和木犀草苷的提取率均略高于超聲提取法。

4.其他方法

除以上提取方法外，也有文獻報道過其他提取方法。如超高壓提取法、超臨界流體萃取法同，而且2005版藥典規定對金銀花中木犀草苷進行含量測定時，采用超聲波輔助提取法制備供試品溶液，經HPLC測定含量。

主要參考資料

[1] 姚德坤;張殿臣;蘇學輝;姚德利;姚航;黃運生;吳海龍;孟祥敏.一種從牛膝藤中制備木犀草苷的方法.CN201310694944.9，申請日20131213

[2] 楊麗軍, 王丹丹, 張允菲, 等. 金銀花中木犀草苷的研究進展[J]. 中國醫藥導報, 2017, 14(24): 58-61.

[3] 何玲, 孫桂波, 孫瀟, 等. 木犀草苷對阿霉素誘導乳鼠心肌細胞損傷的保護作用[J]. 中國藥理學通報, 2012, 28(9): 1229-1234.