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煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸又稱輔酶Ⅱ,脫氫酶輔酶的一種。其為煙酰胺核苷-3′,5′-二磷酸與腺嘌呤核苷酸的縮合物。有氧化型和還原型兩種形式,分別簡寫成NADP+和NADPH+H+。含有維生素B5,在氧化還原反應中的作用機制與煙酰胺腺嘌呤二核苷酸的相同。其為一些不需氧脫氫酶的輔酶,在生物體內起傳遞氫的作用。煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADP)是一種輔酶,其廣泛存在于生物界并參與眾多生理過程;研究顯示,所述煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸NADP在細胞內主要被還原為NADPH,后者是細胞內重要的抗氧化成分,同時還參與合成代謝過程。
近年來的基礎與臨床研究證實,氧化應激損傷是糖尿病腎病的主要發病機制之 一,利用轉基因技術在腎臟過表達抗氧化酶,如超氧化物歧化酶(SOD)或過 氧化氫酶 (catalase),可以明顯改善糖尿病腎臟損傷。基于現有技術的研究基礎與現狀,CN201610070262.4提供化合物煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADP)新的藥用用途,具體涉及化合物煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸NADP在制備防治糖尿病腎病藥物中的用途。
CN201610070262.4通過體外細胞實驗及體內動物實驗,證實了所述NADP能減輕高糖對血管內皮細胞的損傷、改善糖尿病小鼠腎臟損害,進一步可用于制備防治糖尿病腎病的藥物。本發明所述的制備的藥物可采用腹腔注射的途徑使用,使用的NADP的劑量為5- 20mg.kg-1.d-1,開始使用時間優選為糖尿病確診開始,能對糖尿病腎病起到預防和治療作用。本發明為臨床防治糖尿病腎病、改善腎臟病變提供了新的靶點與思路,證實了改善腎臟的氧化應激在糖尿病腎病防治中的重要作用。
肌酸激酶同工酶測定試劑盒(選擇性抑制法)用于測定人體血清或血漿中肌酸激酶同工酶的含量。血清CK-MB(肌酸激酶同工酶)測定的最重要意義在于診斷急性心肌梗塞。臨床上常以CK-MB超過CK總活性作為急性型肌梗塞的診斷依據。肌酸激酶是細胞內能量轉 運、代謝起著至關重要的激酶。肌酸激酶同工酶是肌酸激酶的一種同工酶,是在翻譯后修飾 過而生成的,主要存在于心肌細胞中(還有少量存在于骨豁肌、腸道、舌頭、前列腺以及子宮中),是心肌能量代謝途徑中非常重要的肌酸激酶,由兩個亞基組成,代表肌肉和大腦。
肌酸激酶同工酶的檢驗原理為肌酸激酶(CK)主要的同工酶包括CKMB、CKBB、CKMM, 因為正常血清中幾乎無CKBB,抗M亞單位的抗血清可以和CKMM及CKMB中的M亞單位形成抗原 抗體復合物,從而完全抑制M亞單位的酶活力,將測得的CK活力值乘以2則代表CKMB的活力。肌酸激酶(CK)活力的檢測原理是:CK催化磷酸肌酸與二磷酸腺苷(ADP)反應產生三磷酸腺 苷(ATP)與肌酸;偶聯己糖激酶(HK)及葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PDH)的催化反應。HK催化葡 萄糖與ATP反應,形成葡萄糖-6-磷酸,G6PDH催化葡萄糖-6-磷酸氧化,形成6-磷酸葡萄糖內 酯及NADPH,NADPH生成的速率代表CK活力。
由于抗原是蛋白,本身穩定性極差,在室溫條件下小時內會全部降解.肌酸激酶同工酶在滿足臨床要求后,對其進行穩定性評價。肌酸激酶同工酶測定試劑盒(免疫抑制法) 要攻克的一個難點就是試劑穩定性,必須滿足37℃熱破14天后各個性能指標還能滿足偏差小于10%的要求。而現有試劑難以達到上述要求。
CN201711008283.4提供一種肌酸激酶同工酶雙試劑及其制備方法,在37℃保存14天的情況下,本發明仍保持了較高的試劑穩定性,試劑的測值偏差小于10%。所述方法包括如下步驟:
1)稱量N-乙酰半胱氨酸、磷酸肌酸、二磷酸腺苷、三磷酸腺苷、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶、己糖激酶、肌酸激酶同工酶抗體、聚乙烯吡咯烷酮、月桂基二羥乙基氧化胺及異構抗壞血酸鈉,溶解于水中,得到混合液,將所述混合液與咪唑緩沖液混合后,加入三(壬苯基)亞 磷酸酯溶解,得到試劑I溶液;
2)稱量煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸與葡萄糖,溶解于水中,得到試劑II溶液。
本發明的有益效果是:本發明肌酸激酶同工酶測定試劑盒試劑I中添加了聚乙烯 吡咯烷酮、月桂基二羥乙基氧化胺及三(壬苯基)亞磷酸酯,另外還含有抗氧化劑異構抗壞血酸鈉,提高了試劑的保存穩定性。經過驗證,2-8℃下本發明保質期可以長達一年半,極大的提高了實際的貨架期,其運輸穩定性也大大提高。對于偏遠山區樣本量少的鄉鎮醫院有很大的幫助。且在37℃保存14天的情況下,本發明仍保持了較高的試劑穩定性,試劑的測值偏差小于10%。
[1] 農業大詞典
[2] CN201610070262.4 煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸在制備防治糖尿病腎病藥物中的用途
[3] CN201711008283.4 一種肌酸激酶同工酶雙試劑及其制備方法