491-54-3 / 山奈素的含量測定及應用

背景及概述^[2]

山奈素(CAS號491-54-3)來源為植物來源：姜科植物山柰Kaempferia galanga L. 根莖，小檗科植物窩兒七Diphylleia sinensis Li.根莖，檀香科植物白瑞草Thesium chinense Turcz.全草，大戟科植物貓眼草Euphorbia lunulata Bge.地上部分，豆科植物槐樹Sophora japonica L.的干燥成熟果實。其分布于廣東、廣西、云南、臺灣等省區，栽培。山奈素對金黃色葡萄球菌及傷寒桿菌、綠膿桿菌、痢疾桿菌等均有抑制作用，有抑制大鼠植入羊毛球的發炎作用。山奈素含有多個酚羥基，且具有較強的抗氧化作用。山奈提取物對許多人體酶有抑制作用。

含量測定^[1]

羅漢果茶中山奈素含量測定

一種HPLC測定羅漢果茶中山奈素含量的 方法，包括以下步驟：

(1)制備對照品溶液：取山奈素對照品與甲醇制成對照品溶液；

(2)制備待測樣品溶液：精密取羅漢果茶樣品加甲醇稀釋，制得待測樣品溶液；

(3)取對照品溶液注入高效液相色譜儀測定，建立山奈素標準曲線；

(4)取待測樣品溶液注入高效液相色譜儀測定，獲得山奈素的峰面積，從而根據標準曲線獲得山奈素含量；

具體實施方式

(1)制備對照品溶液：取經五氧化二磷減壓干燥過夜的山奈素對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含10μg的溶液，即得對照品溶液。

(2)制備待測樣品溶液：取羅漢果茶研細，精密稱定30g，精密加入甲醇100ml，稱定重量，加熱回流1小時，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續 濾液50ml，減壓蒸干，殘渣加水30ml分次轉移至分液漏斗中，用水飽和正丁醇40、30、20、20ml分別振搖提取，合并正丁醇提取液，減壓蒸干，殘渣加甲醇14ml使溶解，加18％鹽酸溶 液6ml，置水浴加熱回流30分鐘，放冷，定量轉移至25ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得待測樣品溶液。

(3)分別精密吸取對照品溶液定量稀釋成濃度為0.003057mg·ml^-1、0.006114mg·ml^-1、0.01019mg·ml^-1、0.02038mg·ml^-1、0.03057mg·ml^-1的溶液，分別注入Agilent1100型高效液相色譜儀，進樣10μl，測定峰面積，以進樣量(μg)為橫坐標(X)，山奈素峰面積為縱坐標(Y)，計算得出回歸方程：Y＝5.0732×10³X-3.5162(r＝0.9998，n＝5)色譜條件：5μ，4.6mm×250mm，Diamonsil C18柱，流動相：甲醇-0.4％磷酸氫鈉＝58:42；流速：1.0ml/min，柱溫：30℃，檢測波長：364nm。

(4)取待測樣品溶液注入Agilent1100型高效液相色譜儀進行測定，獲得山奈素峰面積，根據回歸方程計算得到山奈素的含量。取不同批號的羅漢果茶3批分別進行測定，山奈素含量分別為：0.2030mg/塊、0.2027mg/塊，0.2035mg/塊。

應用 ^[2-3]

1、CN201610906122.6提供了一種含有山奈素的殺菌組合物

將兩種不同結構、不同作用機理的殺菌成分進行復配，是擴大防治譜和提高藥效的有效途徑，更重要的是避免或延緩病害對新成份抗性的產生。發明人將異野櫻素與山奈素復配，用于防治作物的病害。具體實施方式為異野櫻素與山奈素的重量份數之比為，15:1，所述的異野櫻素與山奈素的重量之和占藥劑總重量的15％，壬基酚聚氧乙烯醚類 7％，木素磺酸鈉15％，黃原膠3％，硅油5％，丙三醇7％，其余水補足至100％。

2、CN201610723925.8 提供了由山奈素制備的一類具有輻射防護作用的新化合物

一種新的穩定的化合物，其具有降低電離輻射引起的生物損傷的作用，同時該化合物還具有延長動物生存期和存活率的作用，對放療副作用具有明顯的緩解作用，且該化合物毒性較低。本發明開辟了電離輻射損傷防護與救治的新途徑，其中輻射損 傷包括輻射引起的直接損傷和間接損傷；包括輻射引起的哺乳動物外周血白細胞、血小板和紅細胞減少。化療藥物指作用于DNA、RNA和微管蛋白等與細胞生死攸關的抗腫瘤藥物。本發明提供的化合物及其衍生物也可以與已知輻射防護劑聯用。

式(I)的化合物及其藥學上可接受的鹽其中Ar選自：芹菜素、木犀草素、山奈素、槲皮素和貝加因；R1為：R2、R3、R4、R5可相同或不同，選自：氫、甲基、乙基、1-4個羥基取代的C1-C5烷基、氨基取代的C1-C5烷基。

主要參考資料

[1] CN201711369861.7 HPLC測定羅漢果茶中山奈素含量的方法

[2] CN201610906122.6一種含異野櫻素的殺菌組合物

[3]CN201610723925.8 一類具有輻射防護作用的新化合物、其制備方法及其藥物應用