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328-38-1 / D-亮氨酸的提純方法

背景及概述[1]

氨基酸是生物功能大分子蛋白質的基本組成單位,能夠在植物或動物組織中合成,也可由蛋白質水解得到,其在組織的代謝、生長、維護和修復過程中起重要作用。作為重要營養素,氨基酸可從食物中獲取,無須通過其他輔助手段補充,但是,在特殊情況下,為了恢復體內代謝平衡,增強免疫力等,就需要額外的補充各種氨基酸。

亮氨酸、異亮氨酸和纈氨酸都是支鏈氨基酸,它們有助于訓練后肌肉的恢復,控制血糖,并給身體組織提供能量。其中,D-亮氨酸是最有效的一種支鏈氨基酸,但是人體自己不能生產,只能通過飲食獲得,但普通食品中幾乎不含D-亮氨酸,D-亮氨酸多出現在細菌的肽聚糖中。因此,D-亮氨酸多通過發酵法獲得。

D-亮氨酸的提純方法

提純方法[1]

發酵法生產D-亮氨酸多以葡萄糖作為營養物質,在發酵過程中,由于加入的原料糖不能全部被利用,發酵液還夾帶多糖、非還原糖等不能被發酵利用的物質,因此發酵結束后,發酵液中除存在D-亮氨酸外,還有蛋白質、色素、膠體物、原料還原糖、多糖、非還原糖等,以及纈氨酸、異亮氨酸、蛋氨酸等雜氨基酸。

一種D-亮氨酸的提純方法,包括以下步驟:

取D-亮氨酸發酵液體積135L升溫至80℃,攪拌狀態下,保溫半小時進行滅活處理,處理結束后,取樣檢測D-亮氨酸含量為41.89g/L,合計D-亮氨酸5.65kg,控制物料溫度低于40℃,壓力小于0.65MPa,流速220L/h過陶濾,除去菌渣和部分雜質,共收集陶濾液120L,取樣檢測濾液中D-亮氨酸濃度為40.91g/L,合計D-亮氨酸4.91kg。

將所得陶濾清液調節PH至6,70℃下進行濃縮得到濃縮液,使濃縮液中D-亮氨酸的濃度達到110g/L,向濃縮液中加入NaCl,調節濃縮液中的離子強度達到0.25mol/L后,進行梯度降溫,降溫速率為9℃/h,直到濃縮液溫度降至15℃以下,結晶得到D-亮氨酸濕粉6.72kg;

將D-亮氨酸濕粉溶于25L的PH為9.5的氫氧化鈉水溶液中,充分溶解后,補加純化水至D-亮氨酸濃度為150g/L,此時溶液的體積為30L,向溶液中加入鹽酸溶液,反調PH為6后,加入KCl調節溶液的離子強度達到0.08mol/L,以6℃/h的降溫速率進行降溫,當溫度降至15℃時,攪拌30min進行結晶,過濾分離結晶,用與結晶質量相同的5℃的冷水對結晶進行洗滌,洗滌結束后,在80℃、真空度為-0.095MPa條件下對結晶進行干燥,最終得到4.22kgD-亮氨酸晶體。

整個提純過程在潔凈區生產,所得產品純度為99.3%,水分含量為0.04wt%,收率為74.1%。

應用[2-3]

CN202011126111.9報道了D-亮氨酸和氯己定組合物的應用,尤其涉及D-亮氨酸和氯己定組合物在制備預防或治療齲病藥物中的應用。本發明通過實驗研究證明D-亮氨酸增強氯己定對致齲變形鏈球菌的殺菌作用的機制為D-亮氨酸將生物膜狀態的變形鏈球菌轉變為分散狀態的浮游變形鏈球菌,使變形鏈球菌更易殺滅,從而增強氯己定對變形鏈球菌的殺滅作用,通過在口腔殺菌劑氯己定中添加綠色化合物D-亮氨酸,制備D-亮氨酸和氯己定組合物,殺滅致齲變形鏈球菌生物膜,大大降低氯己定的使用濃度,降低氯己定臨床應用的不良反應,達到同等的殺菌效果,具有臨床轉化前景。

CN201180012935.6報道了一種處理、減少或抑制由細菌引起的生物薄膜形成的方法,所述方法包括:將物品與包含有效量的D-氨基酸的組合物接觸,所述組合物實質上不包含所述對應的L-氨基酸,由此處理、減少或抑制所述生物薄膜形成,其中所述D-氨基酸選自由D-丙氨酸、D-半胱氨酸、D-天冬氨酸、D-谷氨酸、D-組氨酸、D-異亮氨酸、D-賴氨酸、D-亮氨酸、D-天冬酰胺、D-脯氨酸、D-谷氨酰胺、D-精氨酸、D-絲氨酸、D-蘇氨酸、D-纈氨酸、D-色氨酸、D-酪氨酸及其組合所組成的組。

參考文獻

[1] [中國發明] CN201910764076.4 一種D-亮氨酸的提純方法

[2] CN202011126111.9D-亮氨酸和氯己定組合物的應用

[3] CN201180012935.6用于處理生物薄膜的方法和涂層