26340-89-6 / L-精氨酸甲酯二鹽酸鹽的制備和應(yīng)用

背景及概述^[1]

L-精氨酸甲酯二鹽酸鹽簡稱Arg·Oet·2HCl，可由L-精氨酸鹽酸鹽與甲醇酯化后得到。L-精氨酸甲酯二鹽酸鹽可用于制備精氨酸衍生物Fmoc-Arg(Pbf)-OH。

制備^[1]

a1.將100L無水乙醇加入預(yù)先干燥的300L反應(yīng)釜內(nèi)，通冰鹽水降溫至-5～-10℃，滴加二氯亞砜13L。

b1.加入D型的Arg.HCl 21.5kg，關(guān)閉冰鹽水，自然升溫至室溫反應(yīng)24小時(shí)。

c1.升溫至35℃反應(yīng)，TLC點(diǎn)板跟蹤反應(yīng)情況，反應(yīng)大約48h結(jié)束。

d1.濃縮：反應(yīng)結(jié)束后，減壓濃縮得到油狀物的L-精氨酸甲酯二鹽酸鹽中間體。

應(yīng)用^[2]

L-精氨酸甲酯二鹽酸鹽可用于制備精氨酸衍生物Fmoc-Arg(Pbf)-OH的方法如下：

(1)引入Boc基團(tuán)

a2.在300L反應(yīng)釜內(nèi)加入150L水，再加入碳酸氫鈉25.2kg，攪拌；

逐漸加入L-精氨酸甲酯二鹽酸鹽油狀物；加入四氫呋喃30L；分批加入(Boc)₂O，26.2kg攪拌，室溫反應(yīng)；

TLC法點(diǎn)板跟蹤反應(yīng)情況，當(dāng)Arg·Oet·2HCl反應(yīng)完即開始處理。

b2.酸化：反應(yīng)完成后調(diào)節(jié)pH 3-4，用石油醚/乙酸乙酯(50L:25L)，萃取；

c2.加鹽飽和，回調(diào)PH 6-7，用乙酸乙酯提產(chǎn)品，用飽和食鹽水洗滌有機(jī)相。

d2.干燥：向有機(jī)相(帶產(chǎn)品的乙酸乙酯溶液中)中加入60kg的無水硫酸鈉，干燥8小時(shí)。

e2.提純濃縮：抽濾掉硫酸鈉固體，減壓蒸餾乙酸乙酯相。濃縮后得到的Boc-ArgOet.HCl 油狀物。

(2)引入Pbf

a3.在300L反應(yīng)釜中加入步驟2得到的Boc-ArgOet.HCl，Pbf-Cl 31.9kg，丙酮200L，碳酸鉀41.7kg，攪拌，加少量水，維持溫度40-45℃，用TLC監(jiān)測反應(yīng)，待Boc-ArgOet.HCl完全反應(yīng)進(jìn)行抽濾，

b3.抽濾，除去固體不溶物，減壓蒸餾丙酮，濃縮后的得到Boc-Arg(Pbf)Oet油狀物待用。

(3)脫Boc

a4.在干燥的300L反應(yīng)釜中，加入3N HCl/乙酸乙酯溶液120L，攪拌下加入Boc-Arg(Pbf) Oet油狀物，維持溫度10-15℃，室溫?cái)嚢琛?/p>

b4.脫Boc完成后，加水洗滌，將產(chǎn)品洗至水相，加適量碳酸鈉調(diào)節(jié)水相pH7。

(4)皂化

a5.將步驟(4)所得水相加95％乙醇100L，攪拌，滴加10N NaOH水溶液調(diào)節(jié)pH 11-12 進(jìn)行皂化。

b5.皂化反應(yīng)結(jié)束后，用6NHCl調(diào)節(jié)反應(yīng)液的pH值至7，降溫至-10-0℃冷凍結(jié)晶；離心，固體用乙酸乙酯攪洗一次，離心甩干收集固體；重結(jié)晶得到H-Arg(Pbf)OH固體。

(5)Fmoc-Arg(Pbf)-OH合成

a6.在反應(yīng)釜中加入H-Arg(Pbf)-OH，水120L、THF，用Na₂CO₃調(diào)節(jié)PH＝8.5。

b6.逐漸加入Fmoc-Osu(芴甲氧羰酰琥珀酰亞胺)，控制溫度15-20℃，PH＝8-9以把Arg(Pbf) 反應(yīng)完，盡量避免Fmoc-Osu過量。

TLC點(diǎn)板跟蹤反應(yīng)情況，從加完Fmoc-Osu開始計(jì)算，反應(yīng)時(shí)間6小時(shí)。

c6.純化：用石油醚/乙酸乙酯(2:1)萃取；水相用HCl酸化至pH＝3，攪拌2小時(shí)。酸化溫度0-10℃；加乙酸乙酯萃取產(chǎn)品；用飽和食鹽水洗至pH達(dá)到6；無水硫酸鈉干燥，真空抽濾除去固體，濾液濃縮，減壓濃縮得到固體，真空干燥得到產(chǎn)品。

產(chǎn)品純度99.6％，最大單雜0.09％，L型異構(gòu)體0.15％。

參考文獻(xiàn)

[1] [中國發(fā)明,中國發(fā)明授權(quán)] CN201710305099.X Fmoc?Arg（Pbf）?OH的合成方法【公開】/Fmoc-Arg（Pbf）-OH的合成方法【授權(quán)】