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花青素(Anthocyanidin)又稱花色素,基本結構為2-苯基苯并吡喃型陽離子,常與一個或多個葡萄糖形成各種花色苷而廣泛存在于藍莓、葡萄、紫甘薯、黑加侖、胡羅卜、紫蘇和紅甘藍等植物中,發揮抗氧化作用。花青素具有增強免疫功能、抑制腫瘤細胞生長、保護肝臟以及有效減輕由氧化應激引起的神經細胞損傷等作用。從紫蘇葉中提取花青素的有效成分紫蘇寧和矢車菊素3,5-二葡萄糖苷(矢車菊素雙葡糖苷),刺激誘導人外周血單個核細胞,觀察到CD3+T細胞、CD4+T細胞、CD8+T細胞、NK細胞以及NKT細胞等免疫效應細胞增殖格局的變化。
實驗以紫蘇寧和矢車菊素3,5-二葡萄糖苷(矢車菊素雙葡糖苷)刺激正常人外周單個核細胞,刺激培養4、7天以后觀察其T細胞亞群、NK細胞以及NKT細胞的刺激增殖作用,結果顯示紫蘇寧和矢車菊素3,5-二葡萄糖苷(矢車菊素雙葡糖苷)對CD4+T細胞和CD8+T細胞的增殖作用呈現隨刺激物濃度升高而增強的趨勢,矢車菊素3,5-二葡萄糖苷(矢車菊素雙葡糖苷)對NK細胞具有刺激生長作用,而紫蘇寧與矢車菊素3,5-二葡萄糖苷(矢車菊素雙葡糖苷)等比例混合沒有發揮互補的刺激作用,初步證實了紫蘇寧和矢車菊素3,5-二葡萄糖苷(矢車菊素雙葡糖苷)具有誘導CD3+T細胞、CD8+T細胞和NK細胞增殖的作用。體外細胞培養時間延長會導致其活力下降,紫蘇寧和矢車菊素3,5-二葡萄糖苷(矢車菊素雙葡糖苷)可以抵抗自由基對脂肪、蛋白質和核酸的氧化性損害,實驗顯示紫蘇寧和矢車菊素3,5-二葡萄糖苷(矢車菊素雙葡糖苷)對細胞的刺激增殖作用隨時間延長而更顯見。但是紫蘇寧和矢車菊素3,5-二葡萄糖苷(矢車菊素雙葡糖苷)在免疫細胞培養中的作用是刺激細胞增長還是抗氧化保護或兼而有之尚待進一步證實。PHA是人T淋巴細胞非特異性促有絲分裂原,可用于制備CD3AK細胞。
本實驗發現,單個核細胞經1%PHA刺激4天后,NK細胞和NKT細胞的增殖率明顯高于對照組,7天以后,CD3+T細胞和CD4+T細胞數逐漸降低。說明PHA在短期內可以刺激細胞生長,尤其是NK細胞和NKT細胞,長期刺激對CD4+T細胞和CD8+T細胞增殖的效果卻遜于紫蘇寧和矢車菊素3,5-二葡萄糖苷(矢車菊素雙葡糖苷)。人參皂苷Rh2具有誘導腫瘤細胞的逆轉和調節免疫功能的作用[6-8]。以Rh2作為刺激物,對單個核細胞4天誘導培養后可以明顯刺激NKT細胞增殖(P<0.01),7天則可以刺激CD4+細胞和CD8+細胞增殖。2個時間段未見對NK細胞有誘導作用。NKT細胞是一種特定的異質性T細胞亞群,兼有NK細胞和T細胞的某些特征。NKT細胞在發揮殺傷作用時不受MHC限制,激活的NKT細胞可以釋放大量細胞因子,增強機體抗感染和抗腫瘤的作用。本文初步證明人參皂苷Rh2對CD8+T細胞和NKT細胞具有增殖效應。以花青素、PHA、人參Rh2組合取代細胞因子誘導免疫效應細胞不僅有效且更經濟,具有良好的應用前景。過繼性細胞免疫治療還須考慮Treg細胞、γδT細胞、DC細胞甚至B淋巴細胞在抗腫瘤過程中所扮演的角色],探究紫蘇寧、矢車菊素3,5-二葡萄糖苷(矢車菊素雙葡糖苷)對上述細胞的作用同樣具有實用意義。
紫蘇寧和矢車菊素3,5-二葡糖苷對免疫效應細胞增殖格局的調節作用