21947-32-0 / 叔丁氧羰酰基正亮氨酸二環(huán)己胺鹽的應(yīng)用

背景及概述^[1]

叔丁氧羰酰基正亮氨酸二環(huán)己胺鹽可用作醫(yī)藥合成中間體。如果吸入叔丁氧羰酰基正亮氨酸二環(huán)己胺鹽，請將患者移到新鮮空氣處；如果皮膚接觸，應(yīng)脫去污染的衣著，用肥皂水和清水徹底沖洗皮膚，如有不適感，就醫(yī)；如果眼晴接觸，應(yīng)分開眼瞼，用流動清水或生理鹽水沖洗，并立即就醫(yī)；如果食入，立即漱口，禁止催吐，應(yīng)立即就醫(yī)。

應(yīng)用^[1]

叔丁氧羰酰基正亮氨酸二環(huán)己胺鹽可用作醫(yī)藥合成中間體。如制備(Pic-Ser-Ala)2-Sub-(Nle-NH2)2，具體步驟為：將叔丁氧羰酰基正亮氨酸二環(huán)己胺鹽（1.24g，3.0mM），HOBt（0.46g，3.0mM）和PyBOP（1.56g，3.0mM）一起溶解在10mlDMF中。加入DIEA（0.77ml，4.5mM）并將混合物攪拌10分鐘。然后將活化的氨基酸裝入手動搖動器中，該搖動器含有在5mlDMF中溶脹的1.61g（1.0mM）對甲基二苯甲基胺樹脂。預(yù)先用5％DIEA的DMF（2x）處理樹脂，并用DMF（3x）洗滌。將反應(yīng)容器搖動1小時30分鐘，此時Kaiser試驗(yàn)得到陰性結(jié)果。用DMF（2x），iPrOH/DCM（1/1）（2x）和DCM（2x）洗滌樹脂，并用33％TFA的DCM溶液除去Boc基團(tuán)。用DMF中的5％DIEA中和后，使用0.5mM（76.6mg）HOBt和0.5mM（78.6μl）DICC在DMF/DCM中將0.25mM（101.0mg）Boc-Sub與0.5mMNle-樹脂偶聯(lián)。48小時后，Kaiser試驗(yàn)略微陽性，并向樹脂中加入另外的HOBt和DICC（各0.25mM）。72小時后，定量Kaiser試驗(yàn)得到93％的偶聯(lián)產(chǎn)率。使用20％乙酸酐和5％DIEA的DMF封端未反應(yīng)的氨基。重復(fù)正常的去保護(hù)，中和和偶聯(lián)循環(huán)以偶聯(lián)Boc-Ala，Boc-Ser（OBz）和Pic。使用在10mlDMF中的1.5mM氨基酸，PyBOP和HOBt，并且在加入2.25mMDIEA之前將氨基酸預(yù)活化10分鐘，然后將混合物加入到樹脂中。

使用Kaiser試驗(yàn)監(jiān)測偶聯(lián)的完成，并且在陽性測試結(jié)果的情況下重復(fù)偶聯(lián)步驟。將0.5g所得樹脂肽（總共1.34g）脫保護(hù)，并使用1.0ml苯甲醚和10mlHF在-5℃下裂解1小時。蒸發(fā)HF，用乙醚洗滌肽樹脂混合物。用0.5％TFA的水溶液萃取肽，然后用冰醋酸萃取。冷凍干燥后，得到57.7mg粗肽。使用乙腈-水（0.1％TFA）緩沖系統(tǒng)，在C-18Vydac制備柱上純化粗肽（22.6mg）。獲得3.5mg純肽。

主要參考資料

[1]WO1993013789HEMOREGULATORYPEPTIDES