16830-15-2 / 積雪草苷的作用

背景及概述^[1][2]

積雪草為傘形科植物，植物學家林奈(Linnaeus，Carolus)于1764年將積雪草歸入天胡荽屬(Hydrocotyle)，并定名為HydrocotyleasiaticaL.。在1879年，德國人UrBan根據花瓣的排列以及果實的棱數將其從天胡荽屬中的獨立出來并建立積雪草屬(Centella)，積雪草歸入該屬并更名為Centellaasiatica(L.)Urb.。積雪草主要分布于南北半球熱帶和亞熱帶地區，主產地為南非、印度、斯里蘭卡、馬來西亞、印度尼西亞、澳大利亞、日本等，我國亦產積雪草。

積雪草在中國的藥用歷史已達二千多年之久，民間常用于治療感冒、扁桃腺炎、傳染性肝炎、痢疾、跌打損傷、疔瘡腫毒、外傷出血等。積雪草現代藥理學研究和應用有了很大發展，表明積雪草可用于治療抑郁癥、皮膚創傷、胃潰瘍、傳染性肝炎、皮膚病和流行性腦脊髓膜炎等。

積雪草的化學成分復雜，主要有三萜類、黃酮類、揮發油類、多炔烯類等。其中三萜類化合物是主要的藥效成分，包括積雪草苷、積雪草苷A、波熱模苷、波熱米苷、參枯尼苷、異參枯尼苷、積雪草酸、羥基積雪草波熱米酸、馬達積雪草酸等。

積雪草總皂苷是從積雪草中提取得到的皂苷類物質的總稱，主要由三萜苷類物質組成，其中代表性成分主要有積雪草苷(Aisaticoside，CASNo.：16830-15-2)、積雪草苷A(AsaiticosideA；Madecassoside，CASNo.：34540-22-2)和積雪草苷B(AsaiticosideB，CASNo.：125265-68-1)。積雪草苷A也叫羥基積雪草苷，積雪草苷B和積雪草苷A是一對同分異構體。積雪草苷A和積雪草苷B與積雪草苷相比多了一個羥基，極性差異較大，較易實現分離，但積雪草苷A和積雪草苷B的差異只在于其中一個甲基歸屬不同，且兩個不同的歸屬處于鄰位關系，這種差異在R基(Glu-Glu-Rha糖鍵)影響下顯得更加微小，因此積雪草苷A和積雪草苷B的分離非常困難，目前尚無有效的方法報道。

積雪草苷(a)、積雪草苷A(b)與積雪草苷B(c)的結構式分別如下：

作用機制^[1]

通過研究積雪草苷對體外培養的成纖維細胞的膠原蛋白合成的影響，以及對裸鼠增生性瘢痕動物模型的作用發現，積雪草苷可作用于成纖維細胞的細胞核，使核分裂相減少，核仁變小或缺失，隨著用藥濃度的增加，細胞內DNA合成減少，細胞生長呈抑制狀態，抑制率最高可達73％，提示積雪草苷的作用機制是阻斷成纖維細胞的增殖，從而減少膠原蛋白的合成，阻止瘢痕增生。

另一方面，用藥組細胞的超微結構有明顯變化，表現為粗面內質網疏松、內容物減少，核蛋白體脫顆粒現象，而且用藥組膠原蛋白的合成總量較對照組明顯減少，呈劑量依賴效應。這說明積雪草苷對粗面內質網這樣一個蛋白合成系統可能有直接作用。

因此，積雪草苷是通過阻斷成纖維細胞的生長增殖，抑制其合成分泌膠原的能力來阻止瘢痕的發生發展。積雪草苷對裸鼠增生性瘢痕動物模型作用的形態學改變除了與體外培養的成纖維細胞相似之外，還能促進瘢痕成纖維細胞調亡，使免疫細胞數目減少，血管閉塞，數量減少，膠原纖維疏松，致使整塊瘢痕組織變軟，體積變小，呈退行性變。

應用^[3]

研究表明，積雪草苷A與積雪草苷B的混合物具有促進傷口愈合、抗皺、抗炎、抗抑郁、促進智力等藥理作用。比較積雪草苷促進傷口愈合，治療疤痕的藥理作用可以發現，積雪草總皂苷的抗炎、抗抑郁、促進智力等藥理作用可能是積雪草苷A與積雪草苷B起了主要作用。同時還有研究表明，不同濃度以及不同質量組成的積雪草苷A與積雪草苷B混合物的抗炎藥理具有明顯的差異，。

制備^[2]

積雪草總苷粗品的制備：500g積雪草粉碎，至于提取罐中，加入10倍原料重量的70%乙醇(v/v)微沸回流提取，第一次提取120min，濾出藥液，再加入10倍原料重量的70%乙醇(v/v)，回流提取60min，合并提取液；

提取液減壓濃縮至密度1.05g/ml，加入4倍水稀釋，離心過濾，得到上柱液a，進D101大孔樹脂柱，水洗至洗脫液近無色，再用3個柱體積20%乙醇(v/v)和4個柱體積50%乙醇(v/v)洗脫，收集50%乙醇(v/v)洗脫液，減壓濃縮至密度1.03g/ml，加入3%活性炭脫色，趁熱過濾得上柱液b；

10%體積的上柱液b進APS2004-50型動態軸向壓縮制備色譜，用50%甲醇(v/v)洗脫，根據紫外在線檢測顯示，分別收集羥基積雪草苷、積雪草苷洗脫液，減壓濃縮，70℃干燥4h得純品積雪草苷3.74g，羥基積雪草苷3.27g。

依據2010版藥典積雪草總苷的含量測定方法，經HPLC分析檢測，積雪草苷含量為94.86%，羥基積雪草苷含量為97.20%。

主要參考資料

[1]張濤, 榮新洲, 楊榮華, 利天增, & 徐盈斌. (2006). 積雪草苷對增生性瘢痕中轉化生長因子-βmrna及基質金屬蛋白酶類表達的影響. 南方醫科大學學報, 26(1), 67-70.

[2] 祁少海, 謝舉臨, & 利天增. (2000). 積雪草甙對燒傷增生性瘢痕作用的實驗研究. 中華燒傷雜志, 16(1), 53-56.

[3] 張濤, 利天增, 祁少海, 徐盈斌, & 謝舉臨. (2005). 積雪草苷對燒傷創面愈合中細胞周期蛋白、增殖細胞核抗原表達的影響. 中華實驗外科雜志, 22(1), 43-45.