145781-92-6 / 醋酸戈舍瑞林的說明書

背景及概述^[1][2]

醋酸戈舍瑞林是促性腺激素釋放激素人工合成10肽。戈舍瑞林被用于控制子宮內膜異位癥及子宮腺肌病的臨床癥狀和體征，預防子宮內膜異位癥術后復發(fā)，均有良好的效果。長期使用醋酸戈舍瑞林可抑制腦垂體促黃體生成素的合成，從而引起男性血清睪丸酮和女性血清雌二醇的下降，停藥后這一作用可逆，初期用藥時醋酸戈舍瑞林可暫時增加男性血清睪丸酮和女性血清雌二醇的濃度。

本藥是一種合成的、促黃體生成素釋放激素的類似物，長期使用可抑制垂體的促黃體生成激素的分泌，從而引起男性血清睪酮和女性血清雌二醇的下降，停藥后這一作用 是可逆的。男性病人在第一次用藥之后21日左右，睪酮濃度可降低到去勢后的水平，在每 28天用藥1次的治療過程中，睪酮濃度一直保持在去勢后的濃度范圍內。

這種睪酮抑制作用可使大多數(shù)病人的前列腺腫瘤消退，癥狀改善。女性患者在初次用藥后21日左右，血清雌 二醇濃度受到抑制，并在以后每28天的治療中維持在絕經(jīng)后水平。這種抑制與激素依賴性的乳腺癌，子宮內膜異位癥相關。

結構

用法用量^[3]

緩釋植入劑：3.6mg。

腹前壁皮下 注射：每次3.6mg，每4周1次。子宮內膜異位癥的治療不應超過6個月。

作用和用途^[3]

為促黃體生成素釋放激素的一種類似物，長期使用本品可抑制腦垂體促黃 體生成素的合成，從而引起男性血清睪丸酮和女性血清雌二醇的下降，停藥后這一作用可逆，初期用藥時本品可暫時增加男性血清睪丸酮和女性血清雌二醇的濃度。男性病人在第1次注射此藥后21日左右血清睪丸酮濃度下降至去勢水平，并在以后的治療中維持此濃度，這可使大 多數(shù)病人的前列腺腫瘤消退，癥狀有所改善。女性患者在初次 給藥后21日左右血清中雌二醇度受到抑制，并在以后每28日 的治療中維持在絕經(jīng)后水平。本品半衰期為2～4小時，對腎功能不全的病人其半衰期將會增加。

用于子宮內膜異位癥、可用激素治療的前列腺癌、絕經(jīng)前期及圍絕經(jīng)期婦女的乳腺癌。

藥代動力學^[1]

本藥具有幾乎完全的生物利用度。每4周使用一注射埋植劑，可保持有效血藥濃度，而無組織蓄積。諾雷德的蛋白結合能力較差，在腎功能正常的情況下，血漿清除半衰期為2-4小時，腎功能不全病人的半衰期將會延長，但對于每月都使用埋植劑的患者來說，這影響非常小，故沒有必要改變這些病人的用量。在肝功能不全的病人中，藥代動力學無明顯的變化。

毒理研究^[1]

在長期重復使用諾雷德的雄性鼠中，曾觀察到良性腦垂體腫瘤的發(fā)病率上升，這一事實與以前已觀察到的行外科去勢后的大鼠的情形相似，但尚未發(fā)現(xiàn)與人體使用的經(jīng)驗有任何關聯(lián)。在小鼠實驗中，長期重復使用數(shù)倍于人類常用劑量的諾雷德后，可發(fā)現(xiàn)胰島細胞及幽門部胃粘膜細胞增生。這些事實與臨床的關系尚不清楚。

不良反應^[3]

可出現(xiàn)皮疹、潮紅、性欲下降、關節(jié)痛、低血壓或高血壓，偶見注射位置上有輕度瘀血。男性可出現(xiàn)乳房腫脹和觸痛、骨骼疼痛暫時性加重、尿道梗阻和脊髓壓縮。女性可出現(xiàn)骨密度丟失、多汗、頭痛、情緒變化、抑郁、陰道干燥、乳房大小的變化。治療初期乳腺癌患者會有癥狀的加劇。子宮肌瘤患者可見肌瘤退行性變性。極少數(shù)子宮內膜異位癥者在治療期 間閉經(jīng)，停止治療后月經(jīng)不恢 復。

注意事項^[3]

1. 對促性腺激素釋放激素 (GnRH)類似物過敏者、孕期和哺乳期婦女禁用。

2. 有尿道阻塞和脊髓壓迫傾向及患有代謝性骨病的患者慎用。

3. 對子宮內膜異位癥患者，加入激素替代療法(每天給予雌激素和孕激素制劑)可以減少骨質丟失和血管舒縮癥狀。

制備^[4]

一種戈舍瑞林的固相合成方法，包括以下步驟：

步驟一、根據(jù)預設替代度sub（0.6mmol/g）=n（合成規(guī)模）/（X(裸2-CTC Resin+n*M）氨基酸分子量這里指Fmoc-Pro-OH 的分子量）可計算出X(裸2-CTC Resinz的質量)=266g Fmoc- Pro-OH在合成樹脂的步驟中投料量為摩爾量的1.3倍即計算得出Fmoc-Pro-OH為87g將稱取替代度為1.1~1.3mmol/g 的2-CTC Resin266g（合成規(guī)模200mmol）加入反應柱中同時加入 3000mlDMF溶脹20min，溶脹后抽掉DMF，在加入3000mlDMF洗滌兩次，每次1min.將稱量好的 Fmoc-Pro-OH87g 在DMF/DCM的混合溶液中冰浴條件下加入摩爾量兩倍的DIPEA(N，N-二異 丙基乙胺)的作用下，室溫反應，反應時間由所期待的替代度決定。

反應后處理DMF洗滌5次 每次3000ml每次1min，然后加入3000ml封閉液（DCM：甲醇：DIPEA=80：15：5）封閉兩次每次 10min得到sub=0.6mmol/g 的Fmoc-Pro-CTC Resin，加入3000ml20%DBLK（哌啶：DMF=1：4）去 除Fmoc兩次，每次時間為10min待去除完畢后加入3000m的DMF洗滌兩次，得到H-Pro-CTC Resin。

步驟二、按照常規(guī)的固相合成方法，將步驟一中的脫完Fmoc的H- Pro-CTC Resin 用DMF洗滌4次，每次3000ml，洗滌時間1min，將稱量好Fmoc-Arg(NO2)-OH9(摩爾量的3倍)、 和HOBT(摩爾量的3倍)投入反應柱中補加DIC、反應1h、待反應完畢后取樹脂20-30粒用少量 DMF洗滌兩遍進行茚三酮檢測顯陽性則表明反應未完全需繼續(xù)反應或是重復偶聯(lián)，若檢測顯陰性則表明反應完全可進行下一步的偶聯(lián)反應，按以上步驟依次偶聯(lián)以下Fmoc保護的氨基酸Fmoc-Leu-OH、Fmoc-D-Ser(tBu)-OH和Fmoc-Tyr(Bzl) -OH到Fmoc-Tyr(Bzl)-D- Ser(tBu)-Leu-Arg(NO2)-Pro-CTC Resin；

步驟三、將Fmoc-Tyr(Bzl)-D-Ser(tBu)-Leu-Arg(NO2)-Pro-CTC Resin加入 3000mlDBLK去除Fmoc 后DMF洗滌4次，每次3000ml，時間1min，加入稱量好HBTU（摩爾量的3 倍）和Fmoc-Ser-OH(摩爾量的3倍)投入反應柱中補加DIPEA和DCM使其攪拌均勻反應10min 抽掉反應液加入DMF洗滌3次，每次3000ml，洗滌時間1min取樹脂20-30粒茚三酮檢測顯陽性則表明反應未完全需繼續(xù)反應或是重復偶聯(lián)，若檢測顯陰性則表明反應完全可進行下一步的偶聯(lián)反應按以上步驟偶聯(lián)Fmoc-Trp-OH得到Fmoc-Trp-Ser-Tyr(Bzl)-D-Ser(tBu)-Leu- Arg(NO2)-Pro-CTC Resin；

步驟四、按照常規(guī)的固相合成方法同步驟二，采用HOBT/DIC、反應1h、DMF作溶劑依次偶聯(lián)Fmoc-His(Trt)-OH、Pyr得到H-Pyr-His(Trt)-Trp -Ser-Tyr(Bzl)-D-Ser(tBu)-Leu- Arg(NO2)-Pro-CTC Resin肽樹脂520g；

步驟五、按1：10（w：v）的樹脂與裂解液的比例配制全保護裂解液5200mL（V三氟乙醇： V二氯甲烷=1：4）加入到H-Pyr-His(Trt)-Trp-Ser-Tyr(Bzl)-D-Ser(tBu)-Leu-Arg(NO2)-Pro- 2-CTC Resin肽樹脂中的攪拌反應2h，待反應完畢后過濾抽掉樹脂保留溶液目的去除其載 體2-CTC Resin；

步驟六、將全保護裂解液取出1ml作HPLC分析定位出峰時間1，然后再將其溶液用 DIPEA（N，N-二異丙基乙胺）調成偏堿性PH=7.8-8.5優(yōu)選7.8-8.2按摩爾量的3倍將稱量好的鹽酸氨基脲和PyBop（1H-苯并三唑-1-基氧三吡咯烷基六氟磷酸鹽[用于肽的偶聯(lián)劑）加入 PH在7.8-8.2左右的全保護裂解液中進行反應偶聯(lián)，反應時間1h，待反應完畢后取出1ml同樣條件下作HPLC分析定位出峰時間2。

然后根據(jù)峰型的變化及有無前移情況從而判斷跟蹤氨基脲的偶聯(lián)情況，如峰型有變化但反應前的峰1沒有完全轉變到反應1h后的峰2說明還未反應完全需繼續(xù)反應，若反應前的峰1完全轉變?yōu)榉磻?h后的峰2說明已經(jīng)反應完全則可以進行下一步實驗最后得到保留側鏈保護基的戈舍瑞林肽溶液即Pyr-His(Trt)-Trp-Ser- Tyr(Bzl)-D-Ser(tBu)-Leu-Arg（NO2）-Pro-Azgly-NH2再將其溶液旋蒸濃縮1h后變?yōu)榈S 色粘稠狀物；

步驟七、配置20%TFA/DCM 的裂解液（v：v=1：4）緩慢加入到步驟六中的粘稠狀物中使其攪拌室溫裂解2h，再將其裂解液緩慢加入冰凍的乙醚中放置30min進行沉降即得到去除His(Trt)上的側鏈保護基Trt前體肽II Pyr-His-Trp-Ser-Tyr(Bzl)-D-Ser(tBu)-Leu- Arg（NO2）-Pro-Azgly-NH2 320g。

步驟八、將步驟七的白色固體粗肽真空抽干按1g/4ml用甲醇溶解溶解體積為 1110ml，加入甲酸銨32g和Pa/c 16g進行氫化反應去除肽序中側鏈保護基NO2和Bzl，從而得到戈舍瑞林粗肽Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-D-Ser(tBu)-Leu-Arg-Pro -Azgly-NH2甲醇溶液；

步驟九、將步驟八的氫化反應后的甲醇溶液過濾后得到995mL加入5倍量的純水將樣品析出離心得到純度90%的戈舍瑞林粗肽固體。

步驟十、制備得到戈舍瑞林。

主要參考資料

[1] CN201510208322.X醋酸戈舍瑞林微球的制備方法

[2] 戈舍瑞林用于乳腺癌治療的研究進展

[3] 實用藥物手冊

[4] CN201510005951.2醋酸戈舍瑞林的固相合成方法