1132-17-8 / 對乙氧基苯磺酰氯的制備方法

概述^[1]

氨基酸是生物體中重要的生命物質,是組成酶和蛋白質的基本單元。由于大多數氨基酸本身沒有紫外吸收，所以先對它們進行柱前-12或柱后3衍生，再對其衍生物進行分析是一種常用的檢測方法。對乙氧基苯磺酰氯可用于衍生一級和二級氨基酸，且與氨基酸反應條件比較溫和，但是它的衍生物對光敏感，且選擇性差。

制備方法^[2]

二氯甲烷(5ml)、9(1g，3.7mmol)和三乙胺(0.52g，3.7mmol)于-10℃、20min內滴加叔丁胺(0.27g，3.7mmol)，室溫加入冰水(10ml)，分層，水層用二氯甲烷(4ml ×3)萃取，合并有機相，無水硫酸鈉干燥，過濾，濾液蒸除溶劑,剩余物經柱色譜(流動相:二氯甲烷)分離，得白色固體3(0.85g,75%)，mp 151～153℃,收率75%，mp150～153℃)。

如上所得對乙氧基苯磺酰氯溶于THF(5ml)中，一78℃攪拌加入叔丁醇鉀(90mg，0.8mmol)，攪拌10min后加入3(2.25g，0.8mmol)。撤掉冰浴，1h后升至室溫攪拌2h。蒸干溶劑，剩余物經柱色譜[流動相：乙酸乙酯-甲醇(10:1)]分離，得無色油狀物，固化后得白色固體1(453mg，87%)，mp 209~211℃。HNMR(CDCl)8: 8.14(d,1H)，7.70(d,1H)，7.44(d,1H)，7.28(m, 1H)，6.83(dd,1H)，6.61(d,1H)，6.09(s,1H)，4.02(q, 2H)，3.73(m, 4H)， 3.60(m, 5H)，3.46(m, 1H),2.60(t, 2H)，2.53(bs,4H)，2.04(m, 2H)，1.83(br, m,4H)，1.61(m, 2H)，1.47(s,9H)，1.43(t,3H)。

乙氧基苯磺酰氯衍生法^[3]

對乙氧基苯磺酰氯衍生法操作比較簡單，只需將對乙氧基苯磺酰氯加入溶有氨基酸的碳酸氫鉀緩沖溶液中，室溫下避光反應35—50 min即可完成衍生。對乙氧基苯磺酰氯與包括二級氨基酸在內的所有氨基酸均起反應，且衍生物比較穩定，一般可放置12—24 h。Yan 等采用對乙氧基苯磺酰氯為柱前衍生試劑，以氨基己二酸為內標物，用RP-HPLC梯度洗脫程序，采用紫外檢測器對氨基酸進行分離測定。此方法簡單、快速且樣品處理簡單，衍生后可直接進樣，適用于臨床檢測和科研需要。近年來國內外報道用對乙氧基苯磺酰氯作為氨基酸的柱前衍生試劑的文獻比較少，是因為它存在以下的缺點：

(1)反應速度比較慢；

(2)對乙氧基苯磺酰氯水解產物也可發射強熒光,干擾測定；

(3)衍生產物對紫外光照比較敏感,反應要在避光條件下進行；

(4)易生成多級衍生產物,給分離測定帶來一定麻煩。

衍生法與色譜結合具有高靈敏度、低檢測限和簡便可靠等特點，在氨基酸的研究中應用廣泛。衍生試劑種類多,各有其獨到之處。用何方法需要根據其衍生速度、分析靈敏度、檢測二級氨基酸能力、干擾因素等各項指標與實際要求選擇。目前，市場上仍然缺乏對20種常見氨基酸都具有高效衍生能力的衍生試劑，所以尋找和開發更好的衍生試劑是我們化學研究者不可推卸的責任。

參考資料

[1] 瞿其曙,湯曉慶,胡效亞,等.柱前衍生法在氨基酸分析測定中的應用[J,化學進展，2006,18(6):104-108.

[2] TANG Tao，SHI Tian-yu,QIAN Kun，et al. Deter-mination of biogenic anines in beer with pre-columnderivatization by high performance liquid chromatogra-phy[J，Journal of Chromatography B，2009,877:507-512.

[3]Nishihashi T, Trandafir CC, Wang A, et al.Enbanced reacti-vity to vasopressin in rat basilar arteries during vasospasmafter subarachnoid hemorrhage[J]. Eur J Pharmacol,2005,513(1-2): 93-100.