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煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(縮寫為NAD),也稱為二磷酸吡啶核苷酸(縮寫為DPN),或 輔脫氫酶Ⅰ或輔酶Ⅰ。在哺乳動物體內存在氧化型(NAD+)和還原型(NADH)兩種狀態,氧化型 (NAD+)在260nm處具有最大紫外吸收光譜,通過各種脫氨酶,從底物中接受一個氫原子和一個電子,變成還原型(NADH),在340nm處有最大吸收。
煙酰胺腺嘌呤二核苷酸參與細胞物質代謝、能量合成、細胞DNA修復等多種生理活動,對機體免疫能力有重要作用。在健康狀態下,人體內煙酰胺腺嘌呤二核苷酸濃度穩定,維持各項細胞正常功能。體內的煙酰胺腺嘌呤二核苷酸濃度決定了細胞衰老的過程和程度,濃度下降會加速細胞衰老的過程。
煙酰胺腺嘌呤二核苷酸主要存在于酵母細胞線粒體中,目前通常選用破壁和提純的方法制備煙酰胺腺嘌呤二核苷酸,常用的破壁方法有溫差法(熱處理法)和高壓均漿法,溫差法破壁效果不理想,高壓均漿法不適合工業化大生產,常用的提純方法為柱洗脫,但是柱洗脫過程繁瑣,耗時長,不利于工業化生產,溶劑使用量大,污染環境,制得的煙酰胺腺嘌 呤二核苷酸純度低,收率低。因此需要提供一種新的制備方法。
本發明提出了一種煙酰胺腺嘌呤二核苷酸的制備 方法,本發明操作簡便,設備簡單,適合工業化生產,大大縮短了制備時間,使用溶劑種類 少、使用量少,使用的原料廉價易得,制備得到的煙酰胺腺嘌呤二核苷酸純度高,收率好。
CN201511022464.3提出的一種煙酰胺腺嘌呤二核苷酸的制備方法,包括如下步驟:
S1、破碎細胞:將酵母細胞加入鹽酸水溶液中浸泡0.5-2.5h,進行溫差破壁處理 后,用陶瓷膜過濾,取濾液得到清液A;
S2、濃縮:取S1中得到的清液A超濾,取超濾液納濾得到濃縮液B,用鹽酸水溶液調 節濃縮液B的pH=2-2.5得到濃縮液C;
S3、洗脫:將S2中得到的濃縮液C過D152樹脂柱,用氨水洗脫,收集洗脫液D,用鹽酸 水溶液調節洗脫液D的pH=7-8后,過717樹脂柱,用氯化鉀水溶液洗脫,收集得到綜合液E;
S4、分離:將S3中得到的綜合液E納濾得到濃縮液F;用硝酸水溶液調節濃縮液F的 pH=1-3,加丙酮沉淀,離心得到固體G;
S5、純化:將S4中得到固體G加水溶解,過制備色譜,脫鹽,分離,收集分離液,濃縮, 凍干得到煙酰胺腺嘌呤二核苷酸。
CN201710469676.9報道了煙酰胺腺嘌呤二核苷酸在制備治療癌性疼痛藥物的應用,通過現代藥理學實驗證明,煙酰胺腺嘌呤二核苷酸對ICR小鼠骨髓腔內接種4T1小鼠乳腺癌細胞后,顯著增加了小鼠的縮足閾值,具有鎮痛作用,提示煙酰胺腺嘌呤二核苷酸可用于治療癌性疼痛。
CN201710469665.0報道了煙酰胺腺嘌呤二核苷酸在制備治療炎性痛藥物中的應用,通過現代藥理學實驗證明,ICR小鼠注射煙酰胺腺嘌呤二核苷酸后,在福爾馬林或完全弗氏佐劑誘導的炎癥疼痛中具有鎮痛作用,提示煙酰胺腺嘌呤二核苷酸可用于治療炎性痛。
CN201710064412.5公開了煙酰胺腺嘌呤二核苷酸在制備預防或治療腎臟缺血性損傷藥物中的應用,開創性的發現了煙酰胺腺嘌呤二核苷酸對于腎臟缺血性損傷的防治作用,同時公開了煙酰胺腺嘌呤二核苷酸在制備預防或治療腎臟缺血性損傷藥物中的應用以及具體能夠應用的劑型,對于防治腎臟缺血性損傷藥物的開發提供了確實可行的藥物實施方案。
[1] 農業大詞典
[2] CN201511022464.3 一種煙酰胺腺嘌呤二核苷酸的制備方法
[3] CN201710469676.9煙酰胺腺嘌呤二核苷酸在制備治療癌性疼痛藥物的應用
[4] CN201710469665.0煙酰胺腺嘌呤二核苷酸在制備治療炎性痛藥物中的應用
[5] CN201710064412.5煙酰胺腺嘌呤二核苷酸在制備預防或治療腎臟缺血性損傷藥物中的應用